Аттенуация вируса гриппа. Свойства аттенуированного вируса гриппа.

Вирус гриппа долгое время представляет постоянную угрозу для здоровья населения. Вспышки инфекции убивают тысячи и госпитализируют миллионы людей. В статье рассматривается этиология этой вирусной инфекции, текущая эпидемиологическая ситуация, методы, используемые для диагностики более сложных случаев.

Этиология

Вирус гриппа, принадлежащий к семейству Orthomyxoviridae, структурно делится на 3 основных типа – A, B и C. Это имеет особое эпидемиологическое значение: многие вспышки и эпидемии гриппа вызываются первыми двумя типами, последний тип чаще всего связан с легкими спорадическими инфекциями верхних дыхательных путей.

Аттенуация вируса гриппа. Свойства аттенуированного вируса гриппа.Вирус гриппа, принадлежащий к семейству Orthomyxoviridae

Этот РНК-вирус имеет оболочку, на поверхности которой обнаруживаются 2 основных гликопротеина, участвующих в патогенезе – гемагглютинин (H или HA) и нейраминидаза (N или NA). 

Вирус гриппа A характеризуется 16 часто изменяющимися гемагглютининами (H1 – H16) и 9 различными нейраминидазами (N1 – N9).

В зависимости от различных комбинаций этих белков вирус гриппа A делится на подтипы (например, H1N1 или H3N2).

Интересно, что номенклатура этих вирусов может быть даже более подробной в зависимости от таких переменных, как местоположение или год, например, Perth / 2009 (H3N2). 

Хотя структура вируса гриппа B схожа, у него нет подтипов – антигены НА и NA на сегодня в основном не изменились.

Эпидемиология

Средний мировой уровень смертности от вируса гриппа составляет 13,8 случая на 100000 случаев. С каждым годом гораздо более высокие показатели наблюдаются среди групп повышенного риска, особенно пожилых людей: в этой популяции показатели почти в 3 раза выше – 38,5 случая на 100 тыс.

Диагностика

Из-за того, что течение болезни самоограничивается, эпидемиологических и клинических данных для подтверждения многих диагнозов гриппа достаточно.

В более сложных клинических случаях могут использоваться лабораторные медицинские методы, такие как полимеразная цепная реакция (ПЦР) и быстрые тесты на грипп. Реже, если лечащий врач считает, что результаты могут быть значимыми для назначения лечения, применяется выделение вируса и рост в культуре клеток. 

Аттенуация вируса гриппа. Свойства аттенуированного вируса гриппа.Диагностика гриппа методом полимеразной цепной реакции (ПЦР)

Клиника

По клинической картине можно выделить 2 группы этого заболевания – неосложненный и осложненный грипп. Гораздо более распространенный неосложненный вариант проявляется:

  • острыми системными симптомами: лихорадка, головная боль, мышечные боли;
  • респираторными симптомами – боль в горле, непродуктивный кашель и т.д. 

У детей часто также диагностируются желудочно-кишечные симптомы – рвота или диарея. Важно помнить, что не у всех инфицированных людей клинические симптомы очевидны. В сезон гриппа до 75% случаев заражения сезонным гриппом протекают бессимптомно.

В некоторых случаях заболевание может осложняться как самим вирусом гриппа, так и вторичной, обычно бактериальной, инфекцией, например, S. pneumoniae или S. aureus. Типичное клиническое проявление последнего – пневмония, но сообщалось о ряде случаев энцефалита или миокардита, часто приводящих к смерти. В случае гибели эта вирусная инфекция очень редко определяется как ведущая причина. 

Аттенуация вируса гриппа. Свойства аттенуированного вируса гриппа.Пневмония

Осложнения инфекции могут возникнуть у любого пациента, но чаще всего госпитализируются пожилые люди (≥65 лет, 309 случаев на 100 тысяч) и младенцы (151 случай на 100 тысяч). Это можно объяснить неадекватностью иммунной системы: у пожилых людей снижают устойчивость к любой форме инфекции сопутствующие заболевания, а новорожденные часто еще не приобрели иммунитет к антигену. 

Помимо этих факторов риска, риск осложнений увеличивается у пациентов любого возраста с множественными патологическими хроническими патологическими процессами, например, хронической почечной недостаточностью, церебральным параличом, патологическим ожирением (ИМТ> 40) и при приеме иммунодепрессантов. Беременность также может быть классифицирована как фактор относительного риска: повышенный риск госпитализации по поводу респираторного заболевания наблюдается во время беременности именно в сезон гриппа.

Экспресс-тесты на грипп

Экспресс-тесты для диагностики гриппа, основанные на обнаружении вирусных антигенов, превосходят все другие практические методы – результаты достигаются менее чем за 30 минут. Самый распространенный метод – иммунологическое исследование респираторного секрета. Это исследование довольно конкретное. Недостаток – тест может определить тип (А или В) вируса гриппа, но не подтип. 

Аттенуация вируса гриппа. Свойства аттенуированного вируса гриппа.Экспресс-тест на грипп

Чувствительность этого теста очень неоднородна. По сравнению с культурой клеток – золотым стандартом лабораторной диагностики гриппа, эти значения варьируются от 4,4 до 80%, в зависимости от популяции пациентов и исследуемого вещества.

Важно отметить, что чувствительность исследования также зависит от возраста – у детей она выше. Кроме того, более высокий уровень вируса в организме в начале заболевания повышает вероятность получения положительного результата теста.

Поскольку рентабельность имеет решающее значение для каждого лечебного учреждения, некоторые ученые попытались оценить эту ситуацию, которая часто возникает в системе первичной медико-санитарной помощи. Но в настоящее время общего вывода нет. Некоторые исследования показывают, что наиболее рентабельной стратегией является рутинная клиническая оценка и своевременная противовирусная терапия.

Молекулярные исследования

Поскольку список вариантов методов диагностики гриппа относительно невелик, утверждается, что молекулярное тестирование должно стать золотым стандартом для лабораторной диагностики гриппа. Хотя в настоящее время разрабатывается ряд методов амплификации генетического материала, большинство исследований, особенно в клинико-диагностических лабораториях, основываются на методе ПЦР. 

Поскольку эти тесты могут обнаруживать более одного антигена за раз, в отличие от экспресс-тестов, можно определить как тип, так и подтип вируса. Кроме того, это, пожалуй, наиболее подходящее исследование динамики вируса гриппа: легко идентифицировать часто изменяющиеся и возникающие подтипы вируса гриппа А, и его важность была особенно очевидна во время пандемии гриппа 2009 г. 

Преобладающее мнение в сообществе профессионалов здравоохранения – что этот метод также более чувствителен, чем культура клеток, из-за возможности обнаружения в исследуемом веществе даже нежизнеспособных форм вируса. Наиболее точные результаты дает взятие мазка из носоглотки.

Лечение

В большинстве случаев сезонного гриппа достаточно симптоматического лечения, снимающего температуру, заложенность носа, головную и мышечную боль, и отдыха дома, чтобы свести к минимуму контакт с окружающими. Важно предупредить пациентов и их родственников, что в случае ухудшения состояния необходимо повторно обратиться к врачу.

Ранние противовирусные препараты (амантадин и римантадин) в настоящее время чаще используются в качестве антагонистов рецепторов NMDA для облегчения двигательных симптомов болезни Паркинсона и действуют исключительно как ингибиторы протонного канала M2 вируса гриппа А. С 2009 г. большинство (> 99%) вирусов гриппа А устойчивы к этим агентам, и их использование не рекомендуется.

Аттенуация вируса гриппа. Свойства аттенуированного вируса гриппа.Римантадин

В настоящее время наиболее часто назначаемые препараты для лечения и профилактики гриппа в Европе – это осельтамивир и занамивир. Они эффективны при лечении гриппа A и B. Важно отметить, что у людей со здоровой иммунной системой ингибирующие репликационные эффекты этих препаратов ограничены и не оказывают заметного эффекта.

Исследований, показывающих использование противовирусных препаратов более чем через 48 часов с момента появления симптомов нет. Но доказано, что наибольший эффект достигается при применении лекарств в течение первых 24 часов. Лечение рекомендуется как детям, так и взрослым с объективно подтвержденной вирусной инфекцией гриппа, которые соответствуют следующим критериям:

  • Лица из группы высокого риска с лабораторно подтвержденной или клинически подозреваемой инфекцией вируса гриппа, если клинические симптомы проявились менее чем за 48 часов до этого.
  • Госпитализированные пациенты, у которых диагностирована лабораторно подтвержденная или клинически подозреваемая вирусная инфекция гриппа, если клинические симптомы появляются менее чем за 48 часов до этого.
  • Амбулаторные пациенты из групп высокого риска, у которых клиническое состояние не улучшается самопроизвольно, или те, кто получил положительные результаты экспресс-теста на вирус гриппа через 48 часов с момента появления симптомов.

В США и Японии заболеваемость гриппом постепенно увеличивается из-за высокого уровня использования осельтамивира. Преобладающий подтип – замена бывшего A (H1N1) на A (H1N1) pdm09, впервые выявленный во время пандемии 2009-2010 гг.

В Европе ситуация лучше – отмечаются единичные случаи резистентности к осельтамивиру.

Читайте также:  Аркоксиа - инструкция по применению, отзывы, аналоги и формы выпуска (таблетки 30 мг, 60 мг, 90 мг и 120 мг) лекарства для лечения артроза и артрита у взрослых, детей и при беременности и взаимодействие с алкоголем

За этим внимательно следят органы общественного здравоохранения, а текущую устойчивость можно проверить в еженедельных обновлениях новостного портала Flu News Europe.

Профилактика – вакцинация

Ежегодная вакцинация против гриппа – наиболее эффективная часть стратегии профилактики гриппа. Из-за высокой частоты мутаций в вирусах гриппа, новые генотипические варианты которых часто легко поражают иммунную систему организма, каждый год выпускаются уникальные вакцины, основанные на глобально распространенных фенотипах вирусов.

Аттенуация вируса гриппа. Свойства аттенуированного вируса гриппа.Ежегодная вакцинация – наиболее эффективная часть стратегии профилактики гриппа

Для сезона гриппа в Северном полушарии 2019–2020 годов Всемирная организация здравоохранения (ВОЗ) и Центр профилактики и контроля заболеваний Европейского союза (ECDC) рекомендуют инактивированную четырехвалентную вакцину со следующим антигенным составом:

  • вирус, схожий с A / Brisbane / 02/2018 (H1N1) pdm09;
  • вирус, схожий с A / Kansas / 14/2017 (H3N2);
  • вирус, схожий с B / Colorado / 06/2017 (строка B / Victoria / 2/87);
  • вирус, схожий с B / Phuket / 3073/2013.

В 2011 году в Европейском Союзе против гриппа также были одобрены для детей и подростков живые аттенуированные вакцины. Важно помнить, что из-за большого разнообразия вариабельных антигенов вакцинация в данном случае не является максимальной защитой от инфекции.

Химиопрофилактика

Предэкспозиционная профилактика гриппа с помощью противовирусных агентов может проводиться в течение более коротких или более длительных периодов, если ожидается неизбежное воздействие, например, у медицинских работников. 

Постконтактная химиопрофилактика должна основываться как на инкубационном периоде от 1 до 4 дней (следовательно, не более 10 дней), так и на индивидуальных факторах риска и продолжительности воздействия.

Средства индивидуальной защиты

Помимо вакцинации и профилактического применения противовирусных препаратов, для обеспечения здоровья населения могут использоваться средства индивидуальной защиты:

  • Гигиена рук: мытье водой с мылом не менее 40-60 секунд, особенно после кашля или чихания, обработка спиртовыми дезинфицирующими средствами;
  • Предотвращение инфекции и заражения: прикрывать рот и нос при кашле или чихании, избегать контакта с больными людьми (например, не трогать глаза, нос или рот, держаться на расстоянии не менее одного метра от пациента, избегать массовых мероприятий; если это не удается, минимизировать время воздействия);
  • Ранняя изоляция дома тех, у кого появились первые симптомы заражения вирусом гриппа.

Ранняя изоляция дома при первых симптомах заражения вирусом гриппа

Все эти методы снижают риск передачи вируса гриппа, но имеющиеся на данный момент доказательства считаются слабыми. Хотя эксперты видят преимущества этих действий, рандомизированные лабораторные исследования подтвердили, что существенной разницы добиться нельзя. Единственное исключение – ношение больных медицинских масок, которые помогают снизить риск заражения при тесном контакте.

Резюме

Из-за глобализации и экспоненциально растущего населения мира люди стали жить теснее, путешествуя на большие расстояния. Другими словами, штаммы вирусов гриппа A и B, преобладающие на одном континенте или даже в стране, могут распространиться по миру всего за несколько дней. В этих условиях возможность новой пандемии – это уже вопрос времени, а не обстоятельств. 

Медицинские работники обязаны предотвратить это, сначала с помощью профилактики, а затем с помощью эффективных методов диагностики и лечения. До сих пор оставались наиболее эффективным методом профилактики вакцины. Соблюдение гигиенических норм, хотя и выглядит привлекательным способом предотвращения инфекции, не подтверждается убедительными доказательствами. 

В более простых случаях для постановки диагноза достаточно точного анамнеза и клинического обследования. Для диагностики более сложных случаев можно использовать быстрые иммунологические и точные молекулярные тесты. 

Поскольку ранние противовирусные препараты не рекомендуются из-за широко распространенной вирусной резистентности, в клинической практике препаратами первого ряда остаются препараты, снимающие симптомы.

Грипп: Этиология

Статьи

  • Опубликовано в:
    «ГРИПП
  • Пособие для врачей, Санкт-Петербург — Харьков, 2007»

Возбудители гриппа относятся к семейству ортомиксовиру-сов (Orthomyxoviridae) и являются пневмотропными вирусами. Схематическое строение вируса гриппа представлено на рис. 1.

Геном вируса складывается из 8 фрагментов однонитчатой РНК, которые кодируют 10 вирусных белков. Фрагменты РНК имеют общую белковую оболочку, соединяющую их, образуя антигенно-стабильный рибонук-леопротеид (S-антиген), который определяет принадлежность вируса к серотипу А, В или С.

Снаружи вирус покрыт двойным липидным слоем, с внутренней стороны которого находится слой мембранного белка.

Рис. 1. Схематическое строение вируса гриппа

Аттенуация вируса гриппа. Свойства аттенуированного вируса гриппа.

Над оболочкой вируса поднимаются два типа «шипов» (гликопротеины) — гемагглютинин (Н) и нейраминидаза (N) — поверхностные антигены вируса гриппа. Гемагглютинин — полипептид, назван так благодаря способности гемолизировать эритроциты.

Он имеет высокую изменчивость и иммуногенность, обеспечивая прикрепление вируса к клетке.

Нейраминидаза — это гликопротеидный комплекс, который определяет ферментативную активность, отвечает за способность вирусной частицы проникать в клетку хозяина и выходить из нее после размножения.

Гемагглютинин и нейраминидаза являются факторами агрессии вируса гриппа. Интенсивность интоксикации при гриппе определяется свойствами гемагглютинина, а нейраминидаза обладает выраженным иммунодепресивным действием.

Оба поверхностных антигена характеризуются выраженной способностью к изменчивости, в результате чего появляются новые антигенные варианты вируса. Гемагглютинины 1, 2, 3-го типов и нейраминидазы 1, 2-го типов содержат вирусы, которые поражают человека.

Другие антигены характерны для вирусов гриппа животных (свиней, собак, лошадей, многих видов птиц и др.).

Вирусы гриппа А. Эти возбудители более вирулентны и контагиозны, чем вирусы гриппа В и С.

Это обусловлено тем, что вирус А содержит 2 типа нейраминидазы (N1, N2) и 4 — гемагглютинина (НО, HI, H2, НЗ); вирус В — 1 и 1 соответственно, поэтому он имеет лишь антигенные варианты внутри одного серотипа; вирус С содержит только гемагглютинин и не содержит нейраминидазу, но он имеет рецептор, который разрушает энзим. Вирусу С несвойственна изменчивость.

Одновременно циркулируют и имеют эпидемическое распространение 2 подтипа вируса гриппа А — H3N2 и H1N1. На сегодняшний день во всем мире доминирует вариант А/Сидней/05/97, А/Берн/07/95 и А/Пекин/262/95.

Характерной чертой современных вирусов гриппа A (H3N2) является изменение ряда их биологических свойств: тяжело размножаются в куриных эмбрионах, не агглютинируют эритроциты кур, взаимодействуют только с эритроцитами человека или морской свинки, имеют низкую иммуногенную активность.

Вирусы гриппа В выделяются только от людей. По вирулентности и эпидемиологической значимости они уступают вирусам гриппа А. По антигенным свойствам гемагглютинин и нейраминидазу вируса В можно разделить на 5 подтипов.

Их изменчивость носит более постепенный и медленный характер, что объясняет эпидемиологические особенности вируса гриппа В (эпидемии возникали 1 раз в 3-4 года до 1988 г.). В мире сейчас циркулируют 2 варианта вируса гриппа В: В/ Пекин/184/93 (Европа, Америка, Африка, Австралия) и В/Виктория/2/87 (Юго-Восточная Азия).

Характерной чертой современных вирусов гриппа А и В является их высокая чувствительность к ингибиторам гемагглютинирующей и инфекционной активности, которые содержатся в сыворотке крови нормальных животных.

Вирусы гриппа С. Вирусы гриппа С, в отличие от вирусов А и В, не вызывают эпидемий, но они могут быть причиной вспышек в организованных детских коллективах. Подъемы заболеваемости гриппом С нередко предшествуют или сопровождают эпидемии гриппа А и В. У детей раннего возраста и более старших возрастных групп он приводит к заболеваниям в легкой и бессимптомной форме.

Для вирусов гриппа С характерна значительно большая стабильность антигенных и биологических свойств. По ряду биологических характеристик эти возбудители отличаются от других представителей семейства ортомиксовирусов.

Им присуща низкая репродуктивная активность в разных клеточных системах и наличие других, чем у вирусов гриппа А и В, рецепторов на поверхности эритроцитов.

Рецептор-деструктирующая активность связана не с нейраминидазой, как у вирусов гриппа А и В, а с ферментом нейраминат-О-ацетилестеразой.

Сложность этиологии усиливают факты выделения от людей вирусов, которые не свойственны человеку. Гены вируса гриппа (H5N1), выделенные в 1997 г.

от человека в Гонконге, оказались подобными генам птичьего вируса, который преодолел межвидовой барьер.

Оказалось, что человеческие и птичьи вирусы гриппа были реасортантами (рекомбинантные штаммы), которые получили внутренние гены РВ1 и РВ2 от перепелиного вируса гриппа A (H9N2) — штаммы А/перепел/ Гонконг/61/97.

Читайте также:  Теопэк таблетки пролонгированного действия 100 мг, 200 мг и 300 мг - инструкция по применению, формы выпуска

Вирусы гриппа малоустойчивы во внешней среде, в течение нескольких часов при комнатной температуре разрушаются. Под действием дезинфицирующих растворов (спирта, формалина, сулемы, кислот, щелочей) они быстро погибают.

Нагревание до 50-60°С инактивирует вирусы в течение нескольких минут, в замороженном состоянии при температуре -70° С они сохраняются годами, не теряя инфекционных свойств, быстро погибают под воздействием ультрафиолетового излучения. Оптимум размножения вируса происходит при +37°С в слабощелочной среде.

Как и другие вирусы, возбудитель гриппа отнюдь не чувствителен к антибиотикам и сульфаниламидам.

Вирус гриппа не растет на обычных питательных средах. Его можно выделить из материала, который получен от больного в первые дни болезни (смывы из носоглотки, мокроты), путем заражения культур или клеток куриных эмбрионов.

Традиционно считалось, что человеческий организм освобождается от возбудителя в ближайшие дни после выздоровления. Однако постепенно накапливались косвенные свидетельства, которые опровергают эту точку зрения. И в 1985 г.

были получены прямые доказательства формирования длительной персистенции вируса гриппа. У одного человека удалось многократно выделять вирус гриппа в течение 9 месяцев и дольше.

Возможность пожизненной персистенции вируса в организме человека продолжает изучаться.

  1. «ГРИПП
  2. Пособие для врачей, Санкт-Петербург — Харьков, 2007»

Научный журнал Успехи современного естествознания ISSN 1681-7494 "Перечень" ВАК ИФ РИНЦ = 0,791

1

Отинова М.А.

Ахматов Э.А.

Патогенетические процессы, происходящие при проникновении вируса гриппа в организм человека, чрезвычайно сложны. Основной мишенью вируса являются клетки однослойного многорядного цилиндрического реснитчатого эпителия дыхательных путей.

Для заражения, вирус должен преодолеть факторы неспецифической резистентности дыхательных путей: вязкие свойства слизи, постоянное движение ресничек цилиндрического эпителия, неспецифические ингибиторы репликации вируса, которые содержатся в слизи секрета дыхательных путей, макрофаги, захватывающие вирус и таким образом приостанавливающие его действие, секреторные IgA.

После проникновения вирус прикрепляется с помощью гемагглютинина к рецепторам клеток-мишеней и проникает внутрь, где происходит внутриклеточный цикл репликации. Уже через 4-6 часов в клетке создается партия новых вирусов, которая «выталкивается» из клетки через поры мембраны.

Через 24 часа число вирусов, предшественник которых проник в клетку, может достигать нескольких сотен миллионов. Важную роль в высвобождении вируса играет нейраминидаза, предотвращающая аггрегацию вирионов-потомков.

Она обеспечивает два важнейших процесса: проникновение вирусной частицы в клетку-хозяина и способность вирусных частиц выходить из клетки после размножения.

Гемагглютинин способен вызывать агглютинацию (склеивание) эритроцитов, что обеспечивает возможность вируса гриппа закрепиться на клетке организма человека.

Молекулярными структурами, ответственными за гемагглютинирующую активность вируса гриппа, являются равномерно распределенные радиальные поверхностные выступы, образуемые субъединицами гликопротеида.

Удаление этих выступов приводит к потере инфекционности и гемагглютинирующей активности. Таким образом, взаимодействие гемагглютинина с клеточной мембраной является первым этапом инфекционного цикла.

Освободившиеся вирионы поражают соседние клетки, часть вирусов проникает в кровь. Поражённые эпителиальные клетки теряют продолговатую форму, округляются, ядро их сморщивается и фрагментируется.

Происходит вакуолизация цитоплазмы с появлением в ней базофильных и оксифильных включений, теряются реснички.

Последующая гибель этих клеток обусловлена не столько цитопатогенным действием вируса гриппа, сколько неспособностью клетки полностью восстанавливаться после активного потребления её ресурсов в процессе синтеза в клетке всех компонентов вирусного нуклеокапсида.

Особое внимание привлекает патогенное воздействие вируса гриппа на эритроциты. Изменяется и форма эритроцитов.

Эритроциты изменённой формы характеризуются нарушенной деформабельностью; это взаимосвязано со способностью к агрегации, что в свою очередь оказывает влияние на выполнение эритроцитами  своих жизненно важных функций и на состояние микроциркуляции в целом.

При комплексном исследовании были выявлены взаимосвязанные нарушения гемостаза и микроциркуляции при гриппе ‒ повышение агрегационной способности эритроцитов с формированием их многомерных конгломератов способствует повышению вязкости крови, тканевой гипоксии, микроциркуляторному блоку.

Увеличение вязкости крови в свою очередь приводит к агрегации форменных элементов и сопровождается снижением объёмной скорости выброса и кровотока, что может стать первопричиной возрастания нагрузки на миокард. Эти гемодинамические нарушения также способствуют изменению калибра сосудов, внутрисосудистой агрегации, развитию сладж-феномена через замедление кровотока.

Таким образом, патогенетические процессы, происходящие при проникновении вируса гриппа в организм человека, имеют обширную направленность и способны произвести мощный разрушающий «удар» как по клеткам, тканям и системам органов, так и по организму в целом.

Библиографическая ссылка

Отинова М.А., Ахматов Э.А. ОСОБЕННОСТИ ПАТОГЕНЕЗА ВИРУСА ГРИППА НА НАЧАЛЬНЫХ ЭТАПАХ ПРОНИКНОВЕНИЯ ВИРИОНОВ В ОРГАНИЗМ ЧЕЛОВЕКА // Успехи современного естествознания. – 2011. – № 8. – С. 128-128;
URL: https://natural-sciences.ru/ru/article/view?id=27724 (дата обращения: 12.05.2022). Аттенуация вируса гриппа. Свойства аттенуированного вируса гриппа.

Аттенуация вируса гриппа. Свойства аттенуированного вируса гриппа

Вирулентные штаммы вируса гриппа, в отличие от авирулентных, имеют протеолитически расщепленный НА, что зависит, по-видимому, от наличия основных аминокислот у С конца НА-1, которые распознаются клеточными протеазами. Инфекционная форма вируса гриппа с расщепленным НА при инфекции млекопитающих образуется только в поверхностных клетках дыхательного тракта.

Аттенуация вируса гриппа А птиц также связана с изменением его НА. Репродукция вирулентных штаммов вируса гриппа кур сопрождалась расщеплением НА, тогда как размножение авирулентных штаммов нуждалось в экзогенном трипсине.

В отличие от вирулентного штамма, вызывающего у кур системное поражение органов, включая лимфоидные ткани, его аттенуированный вариант не поражал лимфоидные ткани.

Мутации в гене, гемагглютинина вируса гриппа А птиц сопровождались аттенуацией вируса, связанной с изменением его клеточного тропизма.

Различия авирулентных штаммов вируса ньюкаслской болезни связаны с изменениями в структуре HN-гена, кодирующего гемагглютинин-нейраминидазу.

Большинство аминокислотных замен располагалось в четырех участках N'-kohца HN белка.

Имеются данные, свидетельствующие о связи вирулентности вируса ньюкаслской болезни и вируса Сендай с расщеплением гликопротеи-на слияния (белок Fo) клеточными протеазами или изменением других свойств белков F и HN.

Нуклеотидная дивергенция в гене НА аттенуированного штамма вируса чумы крупного рогатого скота в 3'-концевом некодирующем участке генома была более выраженной, чем внутри кодирующей области. Вакцинный штамм RA 27/3 вируса краснухи отличался от исходного вирулентного штамма заменой 31 аминокислотного остатка в капсидном белке и в гликопротеине Е-1 — 12 заменами, Е-2 — семью заменами.

Аттенуация вируса гриппа. Свойства аттенуированного вируса гриппа.

Негемагглютинируюший мутант парвовируса собак отличался от исходного «дикого» штамма мутацией генов, кодирующих поверхностные белки VP1 и VP2.

Адаптация буньявирусов к клеткам комаров сопровождалась изменением гликопротеинов оболочки вируса и чувствительности к нейтрализующему действию моноклинальных антител.

Важная роль в определении спектра биологических переносчиков арбовирусов принадлежит наружным белкам вириона, участвующим в прикреплении вируса к поверхности клеток хозяина.

С помощью нейтрализующих моноклональных антител из популяции вирулентного вируса бешенства удается селекционировать варианты с измененным вирус реплицировался только в верхних дыхательных путях и инактивировался в других органах.

При испытаниях на кошках в экспериментальных условиях из 20 вакцинированных животных после контрольного заражения заболело три, а в группе не-вакцинированных — все 12, из них погибли 10.

У вакцинированных животных образовались сывороточные и секреторные нейтрализующие антитела, а также развился клеточный иммунный ответ. Полевые испытания подтвердили безопасность и эффективность вакцинации.

Первый аттенуированный штамм вирус гепатита А получен путем серийного пассирования в культуре клеток при пониженной температуре. Он прошел 15 пассажей в культуре клеток почек обезьяны при 35°С, пять пассажей при 32°С и четыре пассажа — в диплоидных клетках почки человека. Штамм потерял способность заражать обезьян оральным путем, сохранив иммуногенность.

Недостатком вакцины являлась потенциальная опасность реверсии с возможной передачей вакцинного штамма по контакту. Аттенуированный штамм отличался от исходного вирулентного вируса заменой 25 нуклеотидов. В том числе в 5'-концевой некодирующей области генома обнаружено семь замен и пять де-леций.

Из 12 замен аминокислотных остатков только одна обнаружена в белке VP1.

Аналогичный штамм получен при пассировании полевого штамма вируса (НМ175) в культуре клеток AGMK при 35°С 32 раза.

Читайте также:  Пристеночные ветви брюшной части аорты

Вакцинный штамм Н2 аттенуирован пассированием в культуре клеток почки новорожденных обезьян, а затем в фибробластах легких человека (КМВ17).

Вакциной из этого штамма привито более 20 млн человек в Китае — с хорошей эффективностью. Вирус не выделялся из организма привитых и не обнаружил реверсии.

Вакцинный штамм GPE — вируса классической чумы свиней (КЧС) — получен пассированием штамма ALD в разных клеточных культурах при 30°С. Он прошел 142 пассажа в культуре клеток тестикул свиней и клонирован методом предельных разведений, 36 пассажей в культуре клеток тестикул крупного рогатого скота — и вновь клонирован тем же методом, затем 41 пассаж в культуре клеток почки морской свинки.

Вакцинный штамм GPE-, в отличие от исходного вирулентного штамма, хорошо размножался в культуре клеток морской свинки (G-маркер) при 30°С и плохо при 40°С (Т-маркер). Испытание на поросятах подтвердило его безопасность и высокую иммуногенную активность. Геном штамма GPE-отличался от родительского заменой 225 нуклеотидов. На его основе создали GPE-вакцину, которая успешно применяется в Японии.

Штамм Tiverval вируса КЧС получен из вирулентного штамма Альфор после более чем 170 серийных пассажей в культуре клеток при 29—30°С и его можно идентифицировать несколькими маркерами in vitro. По безопасности и иммуногенности он подобен другим вакцинным штаммам вируса КЧС.

В качестве живой вакцины против ящура испытывали «холодный» вариант вируса тип O1, который прошел 120 пассажей в первичной культуре клеток почки телят при 24°С. При испытании в лабораторных условиях штамм (О, — 24°-120) обнаружил аттенуированный фенотип.

Он оказался авирулентным для КРС, морских свинок и 7-мидневных мышей, не передавался горизонтально и вызывал иммунитет.

Сухая вакцина из этого штамма была испытана на серонегативном КРС (более 7 000 голов) в двух республиках СССР в зоне с умеренным климатом, в летний период (температура воздуха +20 +30°С).

Результаты этих испытаний полностью подтвердили результаты лабораторных исследований. Однако прививка этой вакциной КРС в зимний период при содержании практически на открытом воздухе при температуре — 25—30°С вызывала осложнения у 7 из 96 животных, связанные с реверсией вирулентности аттенуированного штамма.

Причиной реверси, вероятно, явилось резкое понижение температуры конечностей, особенно в области копыт, где вирус ящура обычно размножается в естественных условиях. Вьщеленныи от вакцинированных животных вирус сохранял некоторые исходные свойства: размножался при 24°С и не вызывал гибели новорожденных мышей.

Полученные результаты демонстрируют пример реверсии in vivo, зависящий от температуры.

— Вернуться в оглавление раздела «Микробиология.»

Оглавление темы «Физические методы инактивации вирусов для вакцин.»: 1. Физические методы инактивации вирусов. Гамма-лучи в инактивации вирусов. 2. Оценка полноты инактивации вирионов. Вакцина против полиомиелита — ящура. 3. Проблемы инактивации вирусов. Пути разрешения проблем при физической инактивации вирусов. 4. Живые вирусные вакцины. Особенности живых вакцин. 5. Аттенуация вирусов. Генетические мутации вирусов. 6. Делеционные мутации вирусов. Вставки или инсерции в геном вируса. 7. ДИЧ-мутации вирусов. Аттенуация вируса серийными пассажами. 8. Учение об аттенуации Сэбина. Аттенуация вируса полиомиелита по Сэбину. 9. Живая аттенуированная вакцина против кори. Аттенуированный вирус паротита, ветряной оспы, краснухи. 10. Аттенуация вируса гриппа. Свойства аттенуированного вируса гриппа.

Грипп: история, клиника, патогенез

Этиология гриппа

Грипп — острое респираторное вирусное заболевание, этиологически связанное с представителями трех родов — Influenza A virus (вирусы гриппа А), Influenza В virus (вирусы гриппа В) и Influenza С virus (вирусы гриппа С) — из семейства Orthomyxoviridae [2, 26].

Вирус гриппа А был впервые изолирован от свиней американским вирусологом Ричардом Шоупом (1901–1966) в 1930 г.; от людей — тремя годами позже группой английских ученых: Вильсоном Смитом (1897–1965), Кристофером Эндрюсом (1896–1987) и Патриком Лейдлоу (1881–1940) [26].

Рис. 1. Структура вириона вируса гриппа А (Orthomyxoviridae, Influenza A virus)

На поверхности вириона (вирусной частицы) вируса гриппа А имеются две функционально-важные молекулы (рис. 1): гемагглютинин (с помощью которого вирион прикрепляется к поверхности клетки-мишени); нейраминидаза (разрушающая клеточный рецептор, что необходимо при почковании дочерних вирионов, а также для исправления ошибок при неправильном связывании с рецептором) [2, 24, 26].

В настоящее время известны 16 типов гемагглютинина (обозначаемые как Н1, Н2, …, Н16) и 9 типов нейраминидазы (N1, N2, …, N9). Комбинация типа гемагглютинина и нейраминидазы (например, H1N1, H3N2, H5N1 и т. п.) называется субтипом: из 144 (16 × 9) теоретически возможных субтипов на сегодняшний день известны 115 [24].

Природным резервуаром вируса гриппа А являются дикие птицы водно-околоводного экологического комплекса (в первую очередь, речные утки, чайки и крачки), однако вирус способен преодолевать межвидовой барьер, адаптироваться к новым хозяевам и длительное время циркулировать в их популяциях [9–12]. Эпидемические варианты вируса гриппа А вызывают ежегодный подъем заболеваемости и раз в 10–50 лет — опасные пандемии [1, 11, 16].

Вирус гриппа В был открыт в 1940 г. американским вирусологом Томасом Фрэнсисом-младшим (1900–1969). Вирус гриппа В не вызывает пандемии, но является возбудителем крупных эпидемических вспышек [26].

Вирус гриппа С был открыт в 1947 г. американским вирусологом Ричардом Тейлором (1887–1981). Вирус гриппа С вызывает локальные эпидемические вспышки в детских коллективах. Наиболее тяжело инфекция протекает у детей младшего возраста [26].

Вирусы гриппа занимают важное место в структуре заболеваемости людей острыми респираторными вирусными инфекциями (ОРВИ), составляющими до 90% от всех других инфекционных болезней.

По данным Всемирной Организации Здравоохранения (ВОЗ), только тяжелыми формами гриппа в мире ежегодно заболевают 3–5 млн человек. Заболевает ежегодно гриппом и другими ОРВИ в РФ — 25–35 млн, из них 45–60% — дети.

Экономический ущерб РФ от сезонного эпидемического гриппа составляет до 100 млрд руб./год, или порядка 85% экономических потерь от инфекционных болезней [2–8, 20–23].

История гриппозных пандемий

Описание гриппа Гиппократом (460–377 гг. до н. э.) как «перинфского кашля» считается первым научным описанием этого заболевания (412 г. до н. э.).

В IX–XVIII веках грипп был известен под названием «крестьянская лихорадка» — в качестве лечения рекомендовались теплые ванны для ног и подогретое красное вино с пряностями.

С начала XVI века, с ростом плотности населения, эпидемические «волны» стали перекатываться уже через всю Европу. В XVII веке в Европе были зафиксированы пять крупных эпидемий, в XVIII веке — три. Во время эпидемии 1675 г.

известный английский врач Томас Сиденгам (1624–1689) предположил наличие у «английской потницы» инфекционной природы и описал разновидность этого заболевания, названную им febris comatosa, которая сопровождалась развитием симптомов со стороны центральной нервной системы (ЦНС).

В 1889–1892 гг. произошла первая документированная пандемия гриппа А(H2N2). Пандемия «испанского гриппа» (H1N1) (1918–1919 гг.) привела к заболеванию 600 млн и гибели 50–100 млн1 (т. е. 30% и 5% населения Земли соответственно).

Пандемия «азиатского гриппа» (H2N2) (1957–1959 гг.) стала причиной гибели более 1 млн; пандемия «гонконгского гриппа» (1968–1970 гг.) — около 1 млн; крупная эпидемия «русского гриппа» (H1N1) (1977–1978 гг.) — около 300 тыс. человек.

Особенностью пандемий 1889–1892 гг. и «испанки» 1918–1919 гг. было отсутствие информации об этиологическом агенте заболевания (в качестве возбудителя инфекции врачи того времени рассматривали палочку Афанасьева–Пфейффера — Haemophilus influenzae).

Число тяжелых и летальных случаев инфекции резко пошло на убыль в период последующих пандемий, что связано, в первую очередь, с появлением противогриппозных вакцин, штаммовый состав которых ежегодно определяется ВОЗ на основании данных Глобальной программы по мониторингу гриппа (действующей с 1947 г.

), этиотропных противовирусных препаратов Амантадина и Римантадина (1963 г.), а также антибиотиков (1941 г.) для терапии вторичных пневмоний.

Ссылка на основную публикацию
Adblock
detector