Морфология клебсиел. культуральные свойства клебсиел. антигены клебсиел. антигенная структура клебсиел.

Культивирование. Клебсиеллы являются факультативными анаэробами, хемоорганотрофы, обладающие и дыхательным и бродильным типами метаболизма. Оптималь­ная температура роста 36-37° С, рН 7,2. Хорошо растут на всех широко используемых в лабораторной практике питательных средах.

Исследуемый материал (за исключением содержимого толстого отдела кишечника и фекалий) высевают в пробирки с МПБ, на МПА, дифференци­ально-диагностические среды Эндо и Плоскирева.

Соскоб с пораженного участка слизистой оболочки тонкого отдела кишечника (примерно 0,5 г) суспендируют в 10 см3 стерильного физиоло­гического раствора, выдерживают для осаждения крупных частиц 10-15 мин при комнатной температуре и надосадочную жидкость высевают на среды Эндо и Плоскирева.

Аналогичным образом производится посев фекалий. Посевы инкубируют при 37° С в течение 18-24 часов.

По истечении указанного срока пробирки и чашки Петри с посевами просматривают, отбирают характерные для клебсиелл колонии, готовят из них мазки, кото­рые окрашивают по Граму и по Гинсу (для выявления капсул).

При отсутствии роста на плотных питательных средах, но наличии его в МПБ и при обнаружении в нем небольших грамотрицательных палочек осу­ществляют пересев культур из МПБ на плотные питательные среды. Пере­севы инкубируют при указанных выше условиях.

Характерные для клебсиелл колонии, состоящие из грамотрицатель­ных, образующих капсулу палочек, отбирают для дальнейших исследо­ваний.

Характер роста клебсиелл на питательных средах.В жидких питательных средах клебсиеллы растут в виде равномер­ного помутнения с образованием осадка, пленки на поверхности среды, а иногда и пристеночного кольца. Наряду со штаммами, хорошо фер­ментирующими лактозу, имеются и штаммы со слабой лактазной актив­ностью.

Поэтому, в зависимости от степени ферментации лактозы, на дифференциально-диагностических средах колонии могут быть как крас­ные, розовые, непрозрачные с металлическим блеском (т.е. напоминаю­щие лактозопозитивные эшерихии), так и прозрачные, бледно-розовые или бесцветные. На среде Плоскирева колонии могут иметь бежевый или желтый оттенок.

Во всех случаях колонии имеют гладкую выпук­лую поверхность, ровные края, чаще всего слизистую консистенцию.

На МПА клебсиеллы образуют характерные крупные, выпуклые, сли­зистые, часто сливающиеся колонии. Чаще всего они непрозрачны в прохо­дящем свете, а в косопроходящем свете имеют яркую розово-дымчатую окраску. В мазках, приготовленных из таких колоний и окрашенных по-Гинсу, отчетливо выявляется капсула.

Поскольку характер роста на дифференциально-диагностических сре­дах малоинформативен для суждения о принадлежности выделяемых куль­тур к клебсиеллам, выделение возбудителя из исследуемого материала для учшей дифференциации от эшерихии рекомендуют проводить на 48-часовой агаровой культуре.

Морфология клебсиелл в культуре.В мазках, приготовленных с питательных сред, клебсиеллы обнаружи­вают в виде неподвижных, овальной формы палочек размером 0,3-1,5×0,6-6,0 мкм. Грамотрицательные. Спор лишены, образуют капсулу. В мазках располагаются поодиночке, парами или цепочками.

Идентификация клебсиелл по ферментативным признакам.Выделенные чистые культуры микроорганизмов с характерными для клеб­сиелл культуральными, морфологическими и тинкториальными свойства­ми идентифицируют с целью установления родовой, видовой и подвидовой принадлежности на основании изучения ферментативных свойств.

Клебсиеллы оксидазоотрицательные. Индол не выделяют (за исклю­чением K.oxytoca). По пробе с метиловым красным, реакции Фогеса-Проскауэра, способности расти на среде Симмонса с цитратом виды ва­рьируют.

Как правило, по лизиндекарбоксилазе положительные, по ор-иитиндекарбоксилазе и агрининдигидролазе отрицательные. Некоторые видыуреазоположительные. Сероводород не образуют. Способны расти в присутствии KCN. Желатину не разжижают.

Большинство видов сбра­живает все обычно тестируемые углеводы, за исключением дульцитола и эритритола с образованием кислоты и газа. Встречаются штаммы, не об­разующие газ.

Дифференцирующие признаки видов рода Klebsiella представлены в таб­лице 35, ферментативные свойства, отличающие подвиды вида K.pneumoniae — в таблице 36.

Определенные трудности возникают в отличии штаммов K.pneumoniae от неподвижных штаммов Enterobacter aerogenes, которые очень медлен­но разжижают желатину. Решающее значение при этом имеют тесты на уреазу (K.pneumoniae подвида pneumoniae уреазоположительные) и орнитиндекарбоксилазу (K.pneumoniae подвида pneumoniae имеют отрица­тельный признак).

Клебсиеллы

Род Klebsiella относится к семейству Enterobacteriaceae. В отличие от большинства родов данного семейства, бактерии рода Klebsiella обладают способностью образовывать капсулу. К роду Klebsiella относится ряд видов.

Основную роль в патологии человека из них играет вид Klebsiella pneumoniae, которая подразделяется на три подвида: Klebsiella pneumoniae subsp. pneumoniae, Klebsiella pneumoniae subsp. и Klebsiella pneumoniae subsp. rhinoscleromatis.

Однако за последние годы выявлены новые виды клебсиелл (Klebsiella oxytoca, Klebsiella mobilis, Klebsiella planticola, Klebsiella terrigena), которые пока мало изучены и роль их в патологии человека уточняется. Название рода дано в честь немецкого бактериолога Э. Клебса.

Клебсиеллы постоянно обнаруживают на коже и слизистых оболочках человека и животных. К. pneumoniae — частый возбудитель внутрибольничных инфекций, в том числе смешанных.

Морфология клебсиелл

Клебсиеллы — грамотрицательные эллипсоидные бактерии, имеют форму толстых коротких палочек с закругленными концами, размером 0,3-0,6 х 1,5-6,0 мкм, капсульная форма имеет размеры 3-5 х 5-8 мкм. Размеры подвержены сильным колебаниям, особенно у клебсиелл пневмонии.

Жгутики отсутствуют, бактерии спор не образуют, у части штаммов имеются реснички. Обычно видна толстая полисахаридная капсула; бескапсульные формы могут быть получены при воздействии на бактерии низкой температуры, сыворотки, желчи, фагов, антибиотиков и при мутациях.

Расположены попарно или поодиночке.

Биохимические особенности клебсиелл

Клебсиеллы хорошо растут на простых питательных средах, факультативные анаэробы, хемоорганотрофы. Оптимальная температура роста 35-37 °С, рН 7,2- 7,4, но могут расти при 12-41 °С. Способны расти на среде Симмонса, т. е.

использовать цитрат натрия в качестве единственного источника углерода (кроме К. rhinoscleromatis).

На плотных питательных средах образуют мутные слизистые колонии, причем в молодых 2-4-часовых колониях бактерии озены располагаются рассеянно-концентрическими рядами, риносклеромы — концентрическими, пневмонии — петлеобразно, что легко определяется при микроскопии колонии с малым увеличением и может быть использовано для их дифференциации. При росте в МПБ клебсиеллы вызывают равномерное помутнение, иногда со слизистой пленкой на поверхности; на полужидких средах рост более обилен в верхней части среды. Содержание в ДНК Г + Ц — 52-56 мол %.

Клебсиеллы ферментируют углеводы с образованием кислоты или кислоты и газа, восстанавливают нитраты в нитриты. Желатин не разжижают, индола и сероводорода не образуют. Обладают уреазной активностью, не всегда створаживают молоко. Менее всего биохимическая активность выражена у возбудителя риносклеромы.

Антигенная структура клебсиелл

У клебсиелл имеются О- и К-антигены. По О-антигену клебсиеллы подразделяют на 11 серотипов, а по капсульному К-антигену — на 82. Серологическое типирование клебсиелл основано на определении К-антигенов.

Группоспецифический антиген обнаружен почти у всех штаммов клебсиелл. Некоторые К-антигены родственны К-антигенам стрептококков, эшерихий и сальмонелл. Обнаружены О-антигены, родственные О-антигенам Е. coli.

Основными факторами патогенности клебсиелл являются К-антиген, подавляющий фагоцитоз, и эндотоксин. Помимо них, К. pneumoniae может продуцировать термолабильный энтеротоксин — белок, по механизму действия подобный токсину энтеротоксигенной кишечной палочки. Клебсиеллы обладают выраженными адгезивными свойствами.

Эпидемиология клебсиеллеза

Клебсиеллез является чаще всего внутрибольничной инфекцией. Источником служит больной человек и бактерионоситель. Возможно как экзогенное, так и эндогенное заражение. Наиболее частые пути передачи — пищевой, воздушно-капельный и контактно-бытовой. Факторами передачи чаще всего является пищевые продукты (особенно мясные и молочные), вода, воздух.

В последние годы частота клебсиеллезов возросла, одна из причин этого — повышение патогенности возбудителя в связи со снижением резистентности организма человека. Этому способствует также широкое использование антибиотиков, изменяющих нормальное соотношение микроорганизмов в естественном биоценозе, иммунодепрессантов и т. д.

Следует отметить высокую степень резистентности клебсиелл к различным антибиотикам.

Клебсиеллы чувствительны к действию различных дезинфицирующих веществ, при температуре 65 °С погибают в течение 1 ч. Довольно устойчивы во внешней среде: слизистая капсула предохраняет возбудителя от высыхания, поэтому клебсиеллы могут сохраняться в почве, пыли палат, на оборудовании, мебели при комнатной температуре неделями и даже месяцами.

Симптомы клебсиеллеза

Klebsiella pneumoniae чаще всего вызывают заболевание, протекающее по типу кишечной инфекции и характеризующееся острым началом, тошнотой, рвотой, болями в животе, диареей, лихорадкой и общей слабостью. Продолжительность болезни — 1-5 дней.

Клебсиеллы могут вызывать поражение органов дыхания, суставов, мозговых оболочек, конъюнктивы, мочеполовых органов, а также сепсис и гнойные послеоперационные осложнения.

Наибольшей тяжестью отличается генерализованное септико-пиемическое течение болезни, приводящее нередко к летальному исходу.

Klebsiella ozaenae поражает слизистую оболочку носа и его придаточных пазух, вызывает их атрофию, воспаление сопровождается выделением вязкого зловонного секрета. К.

rhinoscleromatis поражает не только слизистую оболочку носа, но и трахею, бронхи, глотку, гортань, при этом в пораженной ткани развиваются специфические гранулемы с последующим склерозированием и развитием хрящевидных инфильтратов.

Течение заболевания хроническое, смерть может наступить на фоне обтурации трахеи или гортани.

Постинфекционный иммунитет непрочный, носит в основном клеточный характер. При хроническом заболевании иногда развиваются признаки ГЧЗ.

Диагностика клебсиеллеза

Основным методом диагностики является бактериологический. Материал для посева может быть различным: гной, кровь, ликвор, испражнения, смывы с предметов и др. Его сеют на дифференциально-диагностическую среду К-2 (с мочевиной, рафинозой, бромтимоловым синим), через сутки вырастают крупные блестящие слизистые колонии с окраской от желтой или зелено-желтой до голубой.

Далее у бактерий определяют подвижность посевом в среду Пешкова и наличие орнитиндекарбоксилазы. Эти признаки не свойственны клебсиеллам. Окончательная идентификация заключается в изучении биохимических свойств и определении серогруппы с помощью реакции агглютинации живой культуры с К-сыворотками. Выделенная чистая культура проверяется на чувствительность к антибиотикам.

Иногда для диагностики клебсиеллеза может быть использована реакция агглютинации или РСК со стандартным О-клебсиеллезным антигеном или с аутоштаммом. Диагностическое значение имеет четырехкратное нарастание титров антител.

Лечение клебсиеллеза

Лечение клебсиеллеза по клиническим показаниям проводится в условиях стационара. При поражении кишечника антибиотики не показаны.

При явлениях обезвоживания (наличие у возбудителя энтеротоксина) перорально или парентерально вводят солевые растворы.

При генерализованных и вялотекущих хронических формах применяют антибиотики (в соответствии с результатами проверки на чувствительность к ним), аутовакцины; проводят мероприятия, стимулирующие иммунитет (аутогемотерапия, пирогенотерапия и т. д.).

Профилактика заболевания

Специфическая профилактика клебсиеллеза не разработана. Общая профилактика сводится к строгому соблюдению санитарно-гигиенических норм при хранении пищевых продуктов, строгому соблюдению асептики и антисептики в лечебных учреждениях, а также соблюдению правил личной гигиены.

Бактериофаг клебсиелл поливалентный очищенный — официальная инструкция по применению, аналоги, цена, наличие в аптеках

Синонимы, аналоги Статьи

ИНСТРУКЦИЯ по медицинскому применению лекарственного препарата

Бактериофаг клебсиелл поливалентный очищенный

Торговое наименование препарата

Бактериофаг клебсиелл поливалентный очищенный

Лекарственная форма

раствор для приема внутрь, местного и наружного применения

Состав

• В 1 мл препарата содержится:
• Действующее вещество:
• Стерильный очищенный фильтрат фаголизатов бактерий Klebsiella pneumoniae, Klebsiella ozaenae, Klebsiella rhinoscleromatis (с активностью по Аппельману — не менее 10-4) — до 1 мл.
• Вспомогательное вещество.
• 8-гидроксихинолина сульфата моногидрат (консервант) в пересчете на 8-гидроксихинолина сульфат — 0,0001 г/мл (содержание расчетное).

Описание

Представляет собой прозрачную жидкость желтого цвета различной степени интенсивности, допускается зеленоватый оттенок.

Фармакотерапевтическая группа

МИБП- бактериофаг

Фармакодинамика:

Препарат вызывает специфический лизис бактерий Klebsiella pneumoniae Klebsiella ozaenae Klebsiella rhinoscleromatis.

1. Лечение и профилактика заболеваний вызванных бактериями Klebsiella pneumoniae Klebsiella ozaenae Klebsiella rhinoscleromatis в составе комплексной терапии:
2. — озена склерома;
3. — заболевания желудочно-кишечного тракта (гастроэнтероколит холецистит панкреатит дисбактериоз кишечника);
4. — воспалительные заболевания новорожденных и детей раннего возраста (гастроэнтероколит дисбактериоз кишечника омфалит пемфигус пиодермия септицемия и септикопиемия различной локализации);
5. — хирургические инфекции (нагноения ран гнойные поражения кожи ожоги перитонит плеврит мастит остеомиелит абсцесс);
6. — урогенитальные инфекции (цистит пиелонефрит уретрит эндометрит вульвит бартолинит кольпит сальпингоофорит);
7. — гнойно-воспалительные заболевания уха горла носа пазух носа ротовой полости глотки гортани бронхов легких и плевры (отит ангина фарингит ларингит стоматит пародонтит гайморит фронтит бронхит пневмония плеврит);
8. — посттравматический конъюнктивит кератоконъюнктивит гнойная язва роговицы и иридоциклит;
9. — профилактика внутрибольничных инфекций вызванных клебсиеллами.

Гиперчувствительность к компонентам препарата.

Применение данного препарата при беременности и в период кормления грудью возможно при наличии инфекций вызванных фагочувствительными штаммами клебсиелл (по рекомендации врача).

Способ применения и дозы:

• Препарат используют для приема внутрь (через рог) в виде клизм аппликаций орошений введения в полости ран вагины матки носа пазух носа а также в дренированные полости: абсцессов брюшную плевральную мочевого пузыря почечной лоханки.
• Внутрь препарат принимают натощак за 05-1 час до приема пищи.
• РЕКОМЕНДУЕМЫЕ ДОЗИРОВКИ ПРЕПАРАТА

ВОЗРАСТ ПАЦИЕНТА	ДОЗА НА 1 ПРИЕМ при различных способах введения препарата
внутрь (мл)	в клизме (мл)
0-6 мес	5	10
6-12 мес	10	20
От 1 года до 3 лет	15	20-30
От 3 до 8 лет	20	30-40
От 8 лет и старше	20-30	40-50

Лечение гнойно-воспалительных заболеваний с локализованными поражениями должно проводиться одновременно как местно так и приемом препарата внутрь.

В случае обработки полости гнойного очага химическими антисептиками перед применением бактериофага она должна быть промыта стерильным 09 % раствором натрия хлорида.

При лечении озены и склеромы препарат используют для промывания полости носа и слизистой оболочки верхних дыхательных путей для введения в полости пазух носа (по клиническим показаниям) а также при поражении глотки гортани трахеи в виде ингаляций (без подогрева и использования ультразвука). Доза препарата для обработки слизистых носа и верхних дыхательных путей 10-20 мл.

После промывания слизистых в полость носа по очереди в каждый носовой ход вводят турунды смоченные препаратом и оставляют на 1 час. Процедуру повторяют 2-3 раза в день в течение 20-40 дней. Поскольку озена и склерома являются хроническими заболеваниями с целью профилактики обострений рекомендуется 1 раз в год проводить 20-40 дневные курсы лечения по вышеприведенной схеме.

При лечении ангин фарингитов ларингитов препарат используют для полосканий полости рта и глотки 3 раза в день по 10-20 мл курс лечения 7-10 дней.

При лечении бронхитов пневмоний препарат принимают внутрь 3 раза в день по 10-20 мл а также применяют в виде аэрозолей и ингаляций (без подогрева и использования ультразвука) курс лечения 15-20 дней.

При лечении отитов препарат используют для промывания и введения в полость среднего уха по 2-5 мл 1-3 раза в день. Курс лечения 7-15 дней.

При лечении воспалений пазух носа препарат используют для промывания полости носа носоглотки и пазух носа в дозе 5-10 мл и введения в пазухи 2-3 мл.

Процедуру повторяют ежедневно однократно в течение 7-10 дней. Кроме того препарат вводят в полость носа в виде турунд смоченных бактериофагом по очереди в каждый носовой ход и оставляют в течение 05-1 часа.

Процедуру повторяют 3 раза в день курс лечения 7-15 дней.

1. При лечении стоматитов и хронических пародонтитов препарат используют в виде полосканий полости рта 3-4 раза в день в дозе 10-20 мл а также введением в пародонтальные карманы турунд пропитанных бактериофагом клебсиелл на 5-10 мин курс лечения 7-10 дней.
2. При конъюнктивитах и кератоконъюнктивитах препарат применяют по 2-3 капли 4- 5 раз в день курс лечения 5-7 дней; при гнойной язве роговицы — по 4-5 капель в день в течение 7-10 дней; при гнойных иридоциклитах — по 6-8 капель каждые 3 часа в сочетании с приемом внутрь в терапевтических дозировках в течение 7-10 дней.
3. При абсцессах после вскрытия и удаления гнойного содержимого препарат вводят в количестве меньшем чем объем удаленного гноя ежедневно однократно курс лечения 7-10 дней.
4. При перитонитах и плевритах препарат вводят в дренированные полости — брюшную и плевральную через дренажные трубки ежедневно однократно 20-70 мл курс лечения 10-15 дней.
5. При остеомиелитах препарат вводят в полость раны через турунды дренажи в количестве 10-30 мл ежедневно однократно курс лечения 15-20 дней.
6. При лечении нагноений ран препарат применяют в виде орошения аппликаций повязок введения в дренаж в дозе 5-50 мл в зависимости от очага поражения не менее одного раза в день курс лечения 10-15 дней.
7. При лечении гнойно-воспалительных гинекологических заболеваний (нагноений ран эндометритов вульвитов бартолинитов кольпитов сальпингоофоритов) препарат используют для орошений аппликаций вводят в полости ран вагины матки по 5-20 мл один раз в день в течение 7-10 дней.

При циститах пиелонефритах уретритах препарат принимают внутрь в терапевтической дозе 3 раза в день за 1 час до еды в течение 10-20 дней. В том случае если полость мочевого пузыря или почечной лоханки дренированы препарат вводят через цистостому или нефростому 1-3 раза в день по 20-50 мл в мочевой пузырь и 5-7 мл в почечную лоханку курс лечения 7-15 дней.

При гастроэнтероколитах панкреатитах холециститах а также дисбактериозах кишечника бактериофаг принимают внутрь в возрастных дозировках 3 раза в день за 1 час до еды в течение 7-15 дней (по клиническим показаниям). При неукротимой рвоте препарат применяют в виде высоких клизм 2-3 раза в день по 20-40 мл. При дисбактериозе кишечника препарат может применяться с препаратами нормофлоры.

• Для профилактики внутрибольничных хирургических инфекций препарат используют для обработки послеоперационных и свежеинфицированных ран в дозе 5-50 мл в зависимости от очага поражения ежедневно однократно в течение 5-7 дней.
• Применение препарата у детей до 1 года (включая недоношенных детей)
• При гастроэнтероколите пневмонии и сепсисе новорожденных препарат применяют через рот 2-3 раза в сутки по 3-5 мл за 30 минут до кормления.

В случаях неукротимой рвоты препарат применяют в виде высоких клизм (через газоотводную трубку или катетер) ежедневно однократно в дозе 5-10 мл. Возможно сочетание ректального (в виде высоких клизм) и перорального применения препарата. Курс лечения 7-15 дней (по клиническим показаниям). При рецидивирующем течении заболевания возможно повторное проведение курсов лечения.

1. С целью профилактики возникновения внутрибольничной инфекции у новорожденных детей бактериофаг применяют по эпидемическим показаниям внутрь по 3-5 мл 3 раза в день за 30 минут до кормления в течение всего срока пребывания в стационаре.
2. При лечении омфалитов пиодермий инфицированных ран бактериофаг применяют в виде аппликаций но 5-10 мл 2-3 раза в день (марлевую салфетку смачивают бактериофагом и накладывают на пупочную ранку или пораженный участок кожи) в течение 7-15 дней.
3. Применение препарата не исключает использование других антибактериальных и противовоспалительных препаратов.

Побочные эффекты:

Не установлено.

Передозировка:

Не установлена.

Взаимодействие:

Применение препарата возможно в сочетании с другими лекарственными средствами в том числе с антибиотиками.

Особые указания:

Важным условием эффективной фаготерапии является предварительное определение чувствительности возбудителя к бактериофагу.

Перед использованием флакон с бактериофагом необходимо взболтать и просмотреть. Препарат должен быть прозрачным и не содержать осадка.

Внимание! При помутнении препарат не применять!

• Вследствие содержания в препарате питательной среды в которой могут развиваться бактерии из окружающей среды вызывая помутнение препарата необходимо при вскрытии флакона соблюдать следующие правила:
• — тщательно вымыть руки;
• — обработать колпачок спиртсодержащим раствором;
• — снять колпачок не открывая пробки;
• — не класть пробку внутренней поверхностью на стол или другие предметы;
• — не оставлять флакон открытым;
• — вскрытый флакон хранить только в холодильнике.
• При использовании малых доз (2-8 капель) препарат необходимо отбирать стерильным шприцем в объеме 05-1 мл.
• Препарат из вскрытого флакона при соблюдении условий хранения вышеперечисленных правил и отсутствии помутнения может быть использован в течение всего срока годности.

Влияние на способность управлять трансп. ср. и мех.:

Применение препарата не оказывает влияние на способность управлять транспортными средствами и механизмами.

Форма выпуска/дозировка:

Раствор для приема внутрь местного и наружного применения.

Упаковка:

1. Во флаконах по 20 мл.
2. По 4 флакона с инструкцией по применению в пачке из картона.
3. По 4 флакона в контурной ячейковой упаковке из пленки поливинилхлоридной.
4. По 1 контурной ячейковой упаковке с инструкцией по применению в пачке из картона.

Условия хранения:

• При температуре от 2 до 8 °С в защищенном от света и недоступном для детей месте.
• Условия транспортирования
• При температуре от 2 до 8 °С допускается транспортирование при температуре от 9 до 25 °С не более 1 мес.

Срок годности:

3 года.

Не применять по истечении срока годности препарата.

Условия отпуска

Без рецепта

Производитель

Акционерное общество «Научно-производственное объединение по медицинским иммунобиологическим препаратам «Микроген» (АО «НПО «Микроген»), 450014, Республика Башкортостан, г. Уфа, ул. Новороссийская, д. 105, Россия

Владелец регистрационного удостоверения/организация, принимающая претензии потребителей:

АО «НПО «Микроген»