Видовой состав лактобацилл. виды лактобацилл. влагалищные палочки. лактобациллы дедерляйна. патогенность лактобацилл. диагностика лактобацилл. методы диагностики лактобацилл.

Оглавление темы «Листерии. Лактобациллы. Коринебактерии.»: 1. Факультативные анаэробные споронеобразующие грамположительные палочки. Общие признаки факультативно-анаэробных бактерий. Особенности факультативно-анаэробных грамположительных бактерий. 2. Листерии. Listeria. Особенности листерий. Эпидемиология листерий. Заболеваемость листериями у животных.

Заболеваемость листериями у человека. Носительство листерий. 3. Культуральные свойства листерий. Рост листерий на твердых средах. Рост листерий на жидких средах. Особенности роста листерий на полужидких средах. 4. Антигенная структура листерий. Антигены листерий. Патогенез поражений листериями. Клинические проявления листериоза. Клиника листериоза.

Проявления заражения листериями. 5. Принципы микробиологической диагностики листериоза. Диагностика листерий. Бактериоскопический, бактериологический, серологический методы диагностики листерий. Лечение листериоза. Профилактика листериоза. 6. Лактобациллы. Lactobacillaceae. Особенности лактобацилл. Свойства лактобацилл. Роль лактобацилл.

Распространенность лактобацилл. 7. Видовой состав лактобацилл. Виды лактобацилл. Влагалищные палочки. Лактобациллы Дедерляйна. Патогенность лактобацилл. Диагностика лактобацилл. Методы диагностики лактобацилл. 8. Коринебактерии. Corynebacterium diphtheriae. Возбудитель дифтерии. Дифтерийная палочка ( палочка Клебса-Лёффлера ). Дифтерия. Гаротильо.

Эпидемиология дифтерии. Распространенность палочки дифтерии. 9. Морфология дифтерийной палочки. Тинкториальные свойства палочки Леффлера. Свойства возбудителя дифтерии. Тельца Бабеша-Эрнста. 10. Культуральные свойства дифтерийной палочки. Культуральные особенности биоваров дифтерии. Биохимическая активность палочки Клебса-Лёффлера. Бактериоцины дифтерии.

Видовой состав лактобацилл в различных отделах ЖКТ и влагалище неодинаков.

• В полости рта обитают Lactobacillus casei, L. acidophilus (палочка Боаса-Опплера), L. fermentum, L. salivarius, L. plantarum, L. brevis и L. buchneri.

• В желудке и тонкой кишке лактобацилл нет или их очень мало (от 0 до 10-104 в 1 г фекалий).

Видовой состав лактобацилл. Виды лактобацилл. Влагалищные палочки. Лактобациллы Дедерляйна. Патогенность лактобацилл. Диагностика лактобацилл. Методы диагностики лактобацилл.

• В толстой кишке содержание лактобацилл в 1 г фекалий достигает 106-1010 и более; основные виды— Lactobacillus acidophilus, L. plantarum, L. casei, L. fermentum, L. salivarius, L. brevis. Изменения в рационе приводят к варьированию видового состава; растительная диета способствует колонизации лактобацилл, преобладание в рационе мяса подавляет её.

• Во влагалище лактобациллы идентифицируют как влагалищные палочки, или лактобациллы Дедерляйна; у 80% здоровых женщин их число достигает 105-107/мл; обычно выделяют 5-6 видов— Lactobacillus casei, L. acidophilus, L. fermentum, L. brevis, L. cellobiosus.

Свойства лактобацилл используют для коррекции дисбактериозов ЖКТ и влагалища, применяя лактобактерин, ацидофилин, «наринэ», пропионовоацидофильное молоко.

Патогенность лактобацилл

Лактобациллы практически не проявляют патогенных свойств, но в составе микробных ассоциатор они способны вызывать кариес и последующие эндокардиты (L.

plantarum), язвенные вульвиты и гастриты (у пациентов с болезнями злокачественного роста), а также хориоамниониты. Рост бактерий ингибируют пенициллины, клиндамицин и цефалотин.

Для эффективного лечения лактобациллярных эндокардитов рекомендовано сочетание пенициллинов с аминогликозидами.

— Также рекомендуем «Коринебактерии. Corynebacterium diphtheriae. Возбудитель дифтерии. Дифтерийная палочка ( палочка Клебса-Лёффлера ). Дифтерия. Гаротильо. Эпидемиология дифтерии. Распространенность палочки дифтерии.»

Видовая идентификация влагалищных лактобацилл, выделенных у женщин репродуктивного возраста

Институт Микробиологии им. С.Н. Виноградского РАН, Москва; ФГУ НИИ физико-химической медицины ФМБА России, Москва; ФГБУ Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. академика В.И. Кулакова Минздравсоцразвития России, Москва

Цель исследования. Определить видовой состав микроаэрофильных лактобацилл у женщин репродуктивного возраста при нормоценозе, мезоценозе и бактериальном вагинозе.
Материал и методы. Изучено 386 изолятов лактобацилл, выделенных из влагалища 30 небеременных женщин репродуктивного возраста, среди которых у 10 был нормоценоз,,у 10 – мезоценоз (10) и у 10 – бактериальный вагиноз.

Видовую идентификацию лактобацилл проводили по белковому спектру методом масс-спектрометрии. Изучена способность всех изолятов к синтезу перекиси водорода, а также штаммовая гетерогенность методом REP-ПЦР типирования.
Результаты исследования. До вида были идентифицированы 379 изолятов лактобацилл (98,2%).

Выделено 6 видов рода Lactobacillus со значительным превалированием трех видов: L. crispatus, L. jensenii, L. gasseri (94,7%). У большинства женщин каждой группы изоляты лактобацилл были представлены каким-либо одним видом: при нормоценозе – L. crispatus (59,4% изолятов), при мезоценозе – L.

jensenii (53,6%), при бактериальном вагинозе – примерно по 30% одного из трех ведущих видов. У женщин с нормоценозом 96,7% изолятов лактобацилл продуцировали перекись водорода, при мезоценозе 30% изолятов теряли такую способность, а при бактериальном вагинозе она отсутствовала почти у 50% изолятов.

Изоляты, выделенные от одной женщины и принадлежащие к одному виду, не отличались по геномным ПЦР-фингерпринтам, что свидетельствует о принадлежности их к одному штамму, но при этом отмечена разная способность изолятов продуцировать перекись водорода.

Заключение. В составе резидентной микрофлоры влагалища у женщин репродуктивного возраста доминируют 3 вида лактобацилл (L. crispatus, L. jensenii, L. gasseri) независимо от состояния микробиоты влагалища (нормоценоз, мезоценоз или бактериальный вагиноз).

Индивидуальные популяции лактобацилл гомогенны по видовому составу у большинства женщин, изоляты генетически принадлежат к одному штамму, но могут различаться по способности продуцировать перекись водорода, что свидетельствует в пользу мнения об эпигеномном наследовании этого признака.

Частота оппортунистических инфекций влагалища имеет тенденцию к росту, несмотря на все расширяющийся арсенал применяемых в клинической практике антимикробных средств [2]. Механизмы развития этой патологии до настоящего времени остаются нераскрытыми.

Расшифровать их невозможно без детального изучения связей макроорганизма и микробиоты влагалища здоровых женщин. Представление о Lactobacillus acidophilus как о практически единственном представителе нормальной микрофлоры влагалища со времен Дедерлейна непоколебимо просуществовало почти столетие.

Только с внедрением молекулярно-генетических методов исследования появилась возможность на новом методическом уровне изучать композиционные особенности состава микробиоты влагалища, которая играет важную роль в колонизационной резистентности этого органа как защитного барьера репродуктивной системы в целом [3, 4, 8].

Первые исследования показали значительное видовое разнообразие лактофлоры и отличия ее в разных этнических группах женщин и в различных регионах мира, что, по-видимому, является генетически обусловленным [3, 6].

Такие исследования могут стать базой для новых терапевтических стратегий в лечении влагалищных инфекций, вызванных условно-патогенными микроорганизмами, а также основой для отбора штаммов при создании биопрепаратов.

В России не было систематических исследований по видовой идентификации влагалищныхлактобацилл у женщин различных возрастных групп и при различном состоянии микроценоза(микробиоты) влагалища. Проблема внутривидового (штаммового) разнообразия лактобацилл
также практически не изучена ни в России, ни в других странах.
Целью настоящего исследования было определить видовой состав лактобацилл у женщин репродуктивного возраста при различном состоянии микробиоты влагалища: при нормоценозе,
промежуточной форме (мезоценозе) и бактериальном вагинозе.

Материал и методы исследования

Изучено 386 изолятов лактобацилл, полученных из отделяемого влагалища 30 небеременныхженщин репродуктивного возраста. Были сформированы 3 группы по 10 женщин в зависимости

от результатов микробиологической диагностики состояния микробиоты влагалища: «нормоценоз», «бактериальный вагиноз» и «мезоценоз». Оценку состояния микроценоза влагалища проводили на основе критериев R.P. Nugent [7], модифицированных нами [1].

Посев отделяемого влагалища (образец), взятого стерильным дакроновым тампоном, проводили на чашку Петри с плотной селективной минерально-растительной средой (МРС). Посевы культивировали в течение 48 ч в микроаэрофильных условиях при температуре 37 ˚С.

Из каждого образца отбирали по 10–15 колоний (изолятов), по возможности, разной морфологии, которые по предварительным тестам (рост на селективной среде, грамположительные каталазоотрицательные палочки) были отнесены к роду Lаctobacillus.

Каждый изолят рассевали петлей методом истощения до получения морфологически однородных отдельных колоний (морфологию колоний контролировали с использованием бинокулярного стереомикроскопа) и отсевали в жидкую среду МРС для накопления биомассы.

Видовую идентификацию всех 386 клинических изолятов проводили по белковому спектру методом MALDI TOF масс-спектрометрии, используя масс-спектрометр Microflex и программный продукт MALDI Biotyper 2.0 фирмы Bruker Daltonics (Германия)…

Исаева А.С., Летаров А.В., Ильина Е.Н., Боровская А.Д., Муравьёва В.В., Анкирская А.С.

Исследование микробиоценоза влагалища с определением чувствительности к антибиотикам

Общая информация об исследовании

Нормальная микрофлора влагалища благодаря стабильности количественного и видового состава препятствует заселению влагалища патогенными микроорганизмами и подавляет чрезмерное размножение условно-патогенных микроорганизмов (УПМ), входящих в небольшом количестве в нормальный микроценоз. Вагинальная микроэкосистема состоит из постоянно обитающих (облигатных) и транзиторных (случайных) микроорганизмов. Основными представителями нормальной микрофлоры влагалища являются:

грамположительные облигатно-анаэробные и микроаэробные бактерии (лактобактерии, бифидобактерии, пептострептококки, клостридии, пропионобактерии, мобилункус),
грамотрицательные облигатно-анаэробные бактерии (бактериоиды, превотеллы, порфиромонасы, фузобактерии, вейлонеллы),
факультативно-анаэробные микроорганизмы (гарднереллы, коринебактерии, микоплазмы, стафило- и стрептококки, энтеробактерии, дрожжевые, грибы рода Candida).

В разные периоды жизни женщины в зависимости от активности репродуктивной функции и гормонального баланса микроценоз влагалища имеет определенные особенности.

До первой менструации и становления менструальной функции на фоне нефункционирующих яичников в составе микрофлоры влагалища преобладают грамположительные кокки – эпидермальный и другие коагулазоотрицательные стафилококки, микрококки, негемолитический стрептококк.

Реже встречаются непатогенные нейссерии и коринебактерии, еще реже – эшерихии и энтерококки. По мере полового созревания увеличивается количество лактобацилл, и у половозрелых девочек микрофлора практически полностью представлена лактобациллами.

У здоровых женщин репродуктивного возраста общее количество микроорганизмов в вагинальном отделяемом составляет 107-109 КОЕ/мл (колониеобразующих единиц на миллилитр) и состоит из более чем 40 разнообразных видов. Преобладают палочки Додерляйна – Lactobacillus spp. (95-98 %) — большая группа бактерий, в основном микроаэрофилов.

Несмотря на разнообразие видового состава лактобацилл, выделяемых из влагалища здоровых женщин (более 10 видов), не удается определить ни одного вида, который присутствовал бы у всех женщин. Чаще всего удается выделить следующие лактобациллы: L. acidophilus, L. brevis, L. jensenii, L. casei, L. leishmanii, L. Plantarum.

Среди транзиторных микроорганизмов влагалища наиболее распространены коагулазоотрицательные стафилококки, в первую очередь S. epidermidis, Corynebacterium spp., Streptococcus spp., Bacteroides, Prevotella spp., Mycoplasma hominis, которые обычно присутствуют в умеренном количестве (до 104 КОЕ/г).

Столь же часто, но в меньшем количестве встречаются Micrococcus spp., Propionibacterium spp., Veillonella spp., Eubacterium spp. Среди сравнительно редко встречающихся микроорганизмов (менее чем у 10 % обследованных) обнаруживаются Clostridium spp., Bifidobacterium spp., Actinomyces spp., Fusobacterium spp.

, Ureaplasma urealyticum, Staphylococcus aureus, Neisseria spp., E. coli и другие колиформные бактерии, Mycoplasma fermentans, Gardnerella vaginalis, Candida spp.

Снижение количества лактобактерий и избыточный рост условно-патогенных микроорганизмов приводит к дисбиотическим нарушениям, которые могут клинически проявиться воспалением стенок влагалища – вагинитом, сопровождающимся выраженным зудом, жжением, аномальными выделениями.

Патологические изменения в вагинальном микроценозе могут возникнуть при лечении антибиотиками (местном или системном), цитостатиками, гормонами, проведении лучевой терапии, особенно на фоне эндокринопатий (в первую очередь при диабете), при анемии, врождённых пороках развития половых органов, при использовании контрацептивов и нарушениях в иммунной системе.

Исследование микробиоценоза влагалища (бакпосев) помогает диагностировать дисбиоз (бактериальный вагиноз), выявить возбудителя неспецифического бактериального вагинита, грибковой инфекции, воспалительного заболевания органов малого таза или инфекций, передающихся половым путем.

Данный метод исследования основан на способности микроорганизмов размножаться на искусственных питательных средах, что позволяет выявить виды бактерий и грибов, обитающих на слизистой, определить их концентрацию и чувствительность к антибактериальным препаратам.

При выявлении вероятного возбудителя инфекционно-воспалительного процесса его инкубируют с антибиотиками или используют диффузионные диски, пропитанные лекарством – препаратом, к которому чувствителен выделенный микроорганизм, – это препятствует росту бактерий.

Бактериологический метод незаменим при инфекциях, вызванных условно-патогенными микроорганизмами (урогенитальными микоплазмами, дрожжевыми грибами, Entrobacteriaceae, Streptococcus spp., Staphylococcus spp. и др.

), так как только с его помощью можно оценить количество возбудителя.

Определение чувствительности к антибактериальным препаратам позволяет избежать назначения бесполезных, но небезопасных препаратов и подобрать адекватную терапию.

Для чего используется исследование?

Для диагностики дисбиотических нарушений состава влагалищной микрофлоры;
для выявления микроорганизма, вызвавшего развитие инфекционно-воспалительного процесса влагалища и органов малого таза;
для определения препаратов, к которым чувствителен возбудитель инфекционно-воспалительного процесса (для подбора эффективной антибактериальной терапии);
для диагностики неспецифического бактериального вагинита/вульвовагинита, бактериального вагиноза, кандидозного вульвовагинита.

Когда назначается исследование?

При клинических признаках воспалительных заболеваний влагалища и органов малого таза (зуд, жжение, бели);
при выявлении инфекционно-воспалительных изменений при микроскопии мазка из влагалища;
при неэффективности лечения вагинита;
при подборе антибактериальных препаратов для лечения воспалительных заболеваний.

Исследование микробиоценоза влагалища с определением чувствительности к антибиотикам: исследования в лаборатории KDLmed

Бактериологическое исследование полученного из влагалища материала, которое позволяет оценить количественный состав микрофлоры, соотношение микроорганизмов, выявить снижение количества лактобактерий, увеличение роста факультативных или появление атипичных микроорганизмов и определить их чувствительность к антибактериальным препаратам.

Синонимы русские

Посев на дисбиоз влагалища с чувствительностью к а/б, посев мазка из влагалища на бак. биоту и чувствительность к а/б.

Синонимы английские
Vaginal Culture with Antibiotic susceptibility testing.
Метод исследования
Микробиологический метод.
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Мазок урогенитальный.
Как правильно подготовиться к исследованию?
Женщинам рекомендуется сдавать урогенитальный мазок или мочу до менструации или через 2 дня после её окончания.
Общая информация об исследовании

грамположительные облигатно-анаэробные и микроаэробные бактерии (лактобактерии, бифидобактерии, пептострептококки, клостридии, пропионобактерии, мобилункус),
грамотрицательные облигатно-анаэробные бактерии (бактериоиды, превотеллы, порфиромонасы, фузобактерии, вейлонеллы),
факультативно-анаэробные микроорганизмы (гарднереллы, коринебактерии, микоплазмы, стафило- и стрептококки, энтеробактерии, дрожжевые, грибы рода Candida).

У здоровых женщин репродуктивного возраста общее количество микроорганизмов в вагинальном отделяемом составляет 107-109 КОЕ/мл (колониеобразующих единиц на миллилитр) и состоит из более чем 40 разнообразных видов. Преобладают палочки Додерляйна – Lactobacillus spp. (95-98 %) — большая группа бактерий, в основном микроаэрофилов.

, Ureaplasma urealyticum, Staphylococcus aureus, Neisseria spp., E. coli и другие колиформные бактерии, Mycoplasma fermentans, Gardnerella vaginalis, Candida spp.

Снижение количества лактобактерий и избыточный рост условно-патогенных микроорганизмов приводит к дисбиотическим нарушениям, которые могут клинически проявиться воспалением стенок влагалища – вагинитом, сопровождающимся выраженным зудом, жжением, аномальными выделениями.

Патологические изменения в вагинальном микроценозе могут возникнуть при лечении антибиотиками (местном или системном), цитостатиками, гормонами, проведении лучевой терапии, особенно на фоне эндокринопатий (в первую очередь при диабете), при анемии, врожденных пороках развития половых органов, при использовании контрацептивов и нарушениях в иммунной системе.

При выявлении вероятного возбудителя инфекционно-воспалительного процесса его инкубируют с антибиотиками или используют диффузионные диски, пропитанные лекарством – препаратом, к которому чувствителен выделенный микроорганизм, – это препятствует росту бактерий.

), так как только с его помощью можно оценить количество возбудителя.

Для чего используется исследование?

Для диагностики дисбиотических нарушений состава влагалищной микрофлоры;
для выявления микроорганизма, вызвавшего развитие инфекционно-воспалительного процесса влагалища и органов малого таза;
для определения препаратов, к которым чувствителен возбудитель инфекционно-воспалительного процесса (для подбора эффективной антибактериальной терапии);
для диагностики неспецифического бактериального вагинита/вульвовагинита, бактериального вагиноза, кандидозного вульвовагинита.

Когда назначается исследование?

При клинических признаках воспалительных заболеваний влагалища и органов малого таза (зуд, жжение, бели);
при выявлении инфекционно-воспалительных изменений при микроскопии мазка из влагалища;
при неэффективности лечения вагинита;
при подборе антибактериальных препаратов для лечения воспалительных заболеваний.

Что означают результаты?
Результат интерпретируется лечащим врачом с учетом жалоб пациентки, анамнеза, клинических проявлений заболевания и исключения инфекций, передающихся половым путем.
Чувствительность к антибиотикам определяется при выявлении диагностически значимого роста условно-патогенной биоты.
В норме в посеве преобладают лактобациллы, условно-патогенные микроорганизмы отсутствуют или выявляются в небольшом количестве – менее 104.

При бактериальном вагинозе рост лактобацилл резко снижен или отсутствует, увеличено количество условно-патогенных микроорганизмов. При посеве могут быть выделены анаэробные микроорганизмы, Gardnerella vaginalis, Mycoplasma hominis, Mobiluncus spp., Bacteroides spp., пептострептококки.

При кандидозном вульвовагините на фоне снижения количества лактобактерий наблюдается рост Candida spp. более 104. При данной патологии при микроскопии материала должен выявляться псевдомицелий гриба.

Неспецифический бактериальный вулвовагинит характеризуется ростом одного или нескольких условно-патогенных микроорганизмов в диагностически значимом титре при снижении количества или отсутствии лактобацилл в посеве.

Что может влиять на результат?

При загрязнении материала вероятен недостоверный результат.
Проведение гигиенических процедур, использование интравагинальных свечей, мазей, спреев за 24 часа до сдачи материала и наличие менструальных выделений искажает результат.
Применение антибактериальных препаратов незадолго до исследования угнетает рост бактерий и снижает его диагностическую ценность.

Важные замечания

Исследование рекомендовано сочетать с микроскопией отделяемого из половых органов, окрашенного по Граму. При клинических признаках инфекционно-воспалительных заболеваний половых органов необходимо в первую очередь исключать инфекции, передающиеся половым путем.
Следует помнить, что все условно-патогенные микроорганизмы могут встречаться и у здоровых женщин и проявляют свои патогенные свойства только при значительной концентрации. Результаты исследования должны интерпретироваться с учетом симптомов заболевания и жалоб пациентки.

Также рекомендуется
Кто назначает исследование?
Акушер-гинеколог.
Литература

Daniels R. Delmar’s Guide to Laboratory and Diagnostics Tests // Cengage Learning – 2009 – 1003 p.
Larsen B., Monif G. Understanding the bacterial flora of the female genital tract. // Clin Infect Dis. – 2001 – 32 (4) – p.69-77.
Инфекции в акушерстве и гинекологии/ Под ред. О. В. Макарова, В. А. Алешкина, Т. Н. Савченко. – М.: МЕДпресс-информ, 2007. – 464 с.

Вопрос 13. Микробиоценоз мочеполовой системы

/. Микрофлора
уретры

2. Микрофлора женских половых органов

3. Влагалищная микрофлора

1.
В
наружной части уретры как
у мужчин, так и у женщин находятся в
небольшом количестве в основном те
же микроорганизмы,
которые обнаруживаются на коже и в
промежности, они
представлены:

коринебактериями;
микобактериями;
грамотрицательными бактериями фекального происхождения;
неспорообразующими анаэробами (пептококки, пептострепто-
кокки, бактероиды).

Эти
микроорганизмы обычно выявляются в
нормальной моче в
количестве 102—104
КОЕ/мл.

На
наружных половых органах мужчин
и женщин локализуются
микобактерий
смегмы (Mycobacteriumsmegmatis),
морфологически
сходные с микобактериями туберкулеза.
Они
обнаруживаются в секрете сальных желез,
находящихся на
головке полового члена у мужчин и малых
половых губ у женщин.

Кроме
того, здесь встречаются стафилококки,
микоплазмы и сапрофитные трепонемы,
морфологически сходные с
возбудителем
сифилиса.
Необходимо
отметить, что качественный
и особенно количественный
состав микрофлоры наружных отделов
мочеполовой системы
у
разных людей варьирует в достаточно
широких пределах.
Для
наружных половых органов мужчин
характерна
добавочная микрофлора:

стафилококки;
коринебактерии;
микоплазмы;
энтеробактерии;
из анаэробов — бактероиды, фузобактерии, анаэробные кокки. В настоящее время установлено, что нормальный бактериальный пейзаж уретры взрослого человека (мужчины) составляют:
стафилококки;
дифтероиды;
диплококки и палочки;
анаэробы (пептококки, бактероиды, энтеробактерии, клостридии);
дифтероиды.

Основная
масса аэробных бактерий обитает в
области ладьевидной
ямки.
Бактериальное
обсеменение уменьшается по мере
продвижения
вглубь мочеиспускательного
канала.
Задняя
уретра и
предстательная
железа обычно
в норме стерильны.

2.
Маточные
трубы, яичники и
полость
матки в
норме стерильны, поскольку
цервикальная слизь содержит лизоцим
и
обладает антибактериальной
активностью. Тем не менее в
цервикальном канале
могут
быть обнаружены различные микроорганизмы,
количество
которых меньше, чем во влагалище.

Половые
пути женщины представлены
совокупностью
микроучастков
нескольких гистотипов. Это
участки:

плоского вагинального эпителия;
цилиндрического эпителия шейки матки;
уникальная область цервикальных желез.

Они
характеризуются определенными
биохимическими и физиологическими
особенностями. Поэтому каждому из них
присуща
своя, несколько отличная от других
популяция микроорганизмов.

Микробами
заселены лишь нижние отделы мочеполового
тракта:

наружные половые органы;
влагалище;
цервикальный канал.

Видовой
состав микрофлоры женских половых
органов, как
и других
эпитопов, относительно
стабилен. Определенные
различия
обусловлены:

возрастом;
беременностью;
фазой менструального цикла.

Микрофлора
влагалища находится
в прямой зависимости от
возраста
и гормонального статуса женского
организма.

Она
начинает формироваться через
12—14 ч после рождения ребенка
—
во влагалищном содержимом появляются
молочнокислые
бактерии — аэробные
лактобациллы {палочка Дедерлейна),
полученные
от матери при родах, которые обитают
здесь до тех пор,
пока реакция среды остается кислой или
слабощелочной (несколько
недель).

Когда
она становится нейтральной (рН среды
равна 7,6), что сохраняется до
полового созревания, в
микробиоценоз влагалища
включается и развивается смешанная
флора —
анаэробы, энтерококки,
стрептококки, стафилококки, коринебактерии.
С
наступлением половой зрелости под
влиянием эстрогенов вагинальный
эпителий увеличивается и в нем сильно
возрастает уровень
гликогена.

Гликоген
—
идеальный субстрат для лактобактерий,
в связи с этим
происходят изменения микробиоценоза
влагалища, которые
характеризуются преобладанием
лактобацилл.
В
результате образования
лактобациллами кислоты из углеводов,
в том числе из гликогена, происходит
понижение рН влагалищного секрета
до 4,0-4,2—4,5.

На
протяжении всего детородного периода
лактобациллы
обеспечивают
поддержание кислой реакции среды на
этом уровне. Это важный механизм в
предупреждении колонизации влагалища
другими, потенциально патогенными
микроорганизмами. 3.
У здоровых
женщин детородного возраста общее
количество микроорганизмов
в вагинальном отделяемом составляет
6—8 х

104
КОЕ/мл. В
зависимости от состава микрофлоры
различают следующие
степени чистоты влагалища здоровых
женщин:

1-я степень: реакция среды кислая, большое количество палочек Дедерлейна (лактобациллы), других видов микроорганизмов почти нет;
2-я степень: реакция среды слабокислая, палочек Дедерлейна мало, в микробиоценозе появляется кокковая флора — стрептококки, стафилококки, обнаруживаются единичные лейкоциты;
3-я степень: реакция среды нейтральная или слабощелочная, единичные палочки Дедерлейна, кокки превалируют, лейкоцитов — до 40 в поле зрения;
4-я степень: реакция щелочная, палочек Дедерлейна нет вообще, большое количество кокков, могут быть другие виды микроорганизмов — энтеробактерии, бактероиды, лейкоциты в огромном количестве.

3-я
и 4-я степени чистоты влагалища женщины
свидетельствуют о наличии воспалительного
процесса урогенитального тракта.

После
наступления менопаузы снижается
продукция эстрогенов,
рН поднимается до 6,0, вагинальный эпителий
становится тоньше
— количество лактобацилл вновь
уменьшается, появляется
смешанная микрофлора. В
состав нормальной влагалищной микрофлоры
в этот период обычно входят:

клостридии;
анаэробные стрептококки (пептострептококки);
стафилококки;
аэробные гемолитические стрептококки группы В;
колиформные бактерии;
дифтероиды;
иногда листерии.

Необходимо
также помнить, что микроорганизмы,
присутствующие во влагалищном
содержимом в момент родов (гемолитические
стрептококки группы В, гонококки,
спирохеты — возбудители
сифилиса, вирус гепатита В), могут
инфицировать ребенка.

В
результате приема противобактериальных
препаратов или в период
беременности у
некоторых женщин в силу индивидуальных
особенностей количество молочнокислых
бактерий в составе влагалищной
микрофлоры уменьшается и
увеличивается количество
других бактерий и, что особенно важно,
дрожжевых
грибов рода
Candida.
Это
приводит к развитию воспалительной
реакции
и заболеванию кандидозом,
широко
известному под названием
«молочница».

Диагностика бактериального вагиноза (количественное определение ДНК Gardnerella vaginalis, Atopobium vaginae, Lactobacillus spp. и общего количества бактерий)

Вагиноз

Проявлением бактериального вагиноза (БВ) становится изменение состава и количественного соотношения влагалищной микрофлоры. БВ возникает чаще всего в репродуктивном возрасте женщины. Около 50 % заболевших женщин не имеют выраженных симптомов, у другой половины БВ может вызвать серьёзные последствия для здоровья — собственного и ребёнка (при беременности).

БВ — распространённая причина патологических выделений, бывает связан с воспалительными заболеваниями органов малого таза. Опасность БВ и в том, что он повышает вероятность заражения ИППП, т. к. разрушает естественную защиту женщины.

Ещё большую опасность БВ представляет для беременных. Он способствует развитию патологий беременности — досрочных родов, выкидышей (самопроизвольных абортов), низкого веса младенца, провоцирует вагинит, послеродовой эндометрит (воспаление маточного эндометрия).

Микрофлора здоровой женщины включает свыше 40 разных видов микроорганизмов и в количественном отношении составляет 107-109 КОЕ/мл.

Здоровая микрофлора (нормофлора) состоит преимущественно из палочек Додерляйна (влагалищных палочек) — лактобацилл, на которые приходится около 95 % нормофлоры.

В процессе жизнедеятельности они поддерживают стабильный биохимический состав, выполняют защитные функции. Оставшиеся 5 % оставляют свыше 300 микроорганизмов

Лактобациллы перерабатывают гликоген в одноосновную карбоновую (молочную) кислоту, продуцируют перекись водорода, тем самым поддерживая рН-баланс влагалища (3,8 — 4,5) и сдерживая кислотность. В таких условиях успешно сдерживается размножение условно-патогенной микрофлоры (УПМ).

При развитии бактериального вагиноза нарушается соотношение УПМ и лактобактерий. Рост первых и снижение количества последних приводит к дисбиозу, нарушениям, вызывающим вагинит (воспаление стенок влагалища, которое сопровождают зуд, аномальные выделения, жжение). Преимущественная в количестве лактофлора заменяется полимикробными ассоциациями гарднереллы и анаэробных бактерий.

Чаще прочих при БВ бурно растут Atopobium vaginae и Gardnerella vaginalis. Гарднерелла, факультативный анаэроб, входит в условно-патогенную микрофлору влагалища. Она выявляется почти у 100 % пациенток с бактериальным вагинозом. Размножаясь, гарднерелла вытесняет преобладающих в нормофлоре лактобактерий, способствует избыточному росту микоплазм, анаэробных бактерий.

Её избыточному росту способствуют вагинальные спринцевания, ВМС и ВМК (контрацептивы), анальный секс, гонококковая и хламидийная инфекции, хирургические вмешательства, гормональная терапия и гормональные изменения в организме, длительный приём антибактериальных препаратов, в некоторых случаях — беременность, подростковый возраст.

Грамположительная анаэробная Atopobium vaginae также выявляется примерно у 100 % пациенток с БВ. Бактерия способствует развитию воспалительных процессов в органах малого таза, её часто обнаруживают при рецидивах БВ.

Выявление описанных микроорганизмов имеет исключительную важность при диагностике БВ, с проявленными симптомами и без симптомов, для предотвращения осложнений и для назначения эффективного патогенетического лечения.

Диагностика бактериального вагиноза

Для диагностики БВ применяют в сочетании анализ клинических проявлений и лабораторных исследований. В лабораторном тестировании важно определить видовой состав микрофлоры и количественное соотношение бактерий разных видов — лактобактерий, гарднерелл и других.

В современных методах диагностики БВ ведущая роль у ПЦР в режиме «реал-тайм». Это молекулярное исследование выявляет генетические фрагменты возбудителя. ПЦР обладает высокой диагностической специфичностью и чувствительностью, позволяет быстро получить точный результат. С помощью ПЦР можно выявить ДНК вируса даже при чрезвычайно малом её содержании в биоматериале.

Основа метода — многократное увеличение количества копий участка ДНК, специфического для искомого возбудителя. Во время исследования проводят количественную оценку ДНК бактерий (их общее количество), ДНК лактобактерий, гарднерелл, Atopobium vaginae, анализируют, в каком соотношении находятся их концентрации.

Метод позволяет диагностировать БК даже при бессимптомном течении, отлично работает в случаях патологий беременности, воспалительных осложнений после родов, используется для назначения и контроля терапии.

Нужно учитывать, что при контроле терапии ПЦР выявляет фрагменты ДНК не только живых, но и разрушенных бактериальных организмов. Потому даже при эффективном лечении результат тестирования ещё некоторое врем остаётся положительным.

Также необходимо знать, что примерно у половины пролечившихся женщин БВ рецидивирует и необходим отдалённый контроль даже без наличия симптомов.

Цели исследования

Исследование методом ПЦР назначают, чтобы:
выявить количество ДНК представителей условно-патогенной микрофлоры;
чтобы определить количественное соотношение ДНК атопобиум (Atopobium vaginae), гарднерелл (Gardnerella vaginalis), лактобацилл (Lactobacillus spp);
чтобы установить происхождение бактериального вагиноза, выявить его осложнения;
чтобы назначить эффективную патогенетическую терапию БВ;
чтобы контролировать ход лечения.

В каких случаях назначают:

если у женщины появились симптомы БВ — патологического вида влагалищные выделения — белые или серые, жжение и зуд, «рыбный» запах выделений, усиливающийся перед менструациями, после половых актов;
при течении без симптомов, когда врач по ряду косвенных признаков или логическим путём предполагает наличие БВ;
если развиваются осложнения БВ, патологии беременности — роды ранее срока, выкидыши (самопроизвольные аборты), ребёнок рождается с низким весом, после родов развивается вагинит, эндометрит;
если назначена терапия БВ и необходимо проконтролировать её результаты.