Иммунодиагностика инфекционных заболеваний. Иммунологический метод. Феномен прозоны. Иммунодиагностические тесты.

17 Февраля 2020
Уважаемые пациенты!
В настоящее время вы встречаетесь с целым рядом новых методов диагностики туберкулезной инфекции, введение которых в практику привели к изменению подходов к применению уже известных методов и к изменению нормативных документов.
Информация, представленная в данном обращении, позволит вам найти ответы на многие вопросы относительно профилактики, диагностики и лечения туберкулезной инфекции у детей.

Традиционно вакцинация против туберкулеза с применением БЦЖ или БЦЖ-М (ослабленной вакцины), когда вводится другой вид микобактерий – микобактерии M.bovis-BCG, проводится на 3-7 день жизни ребенка в родильном доме для создания противотуберкулезного иммунитета, при отсутствии противопоказаний.

Необходимо понимать, что в случае отказа от вакцинации, вы подвергаете ребенка риску попасть в контакт с больным туберкулезом и остаться без иммунной защиты.

В случае возникновения ситуации, когда новорожденному вакцинация БЦЖ не проведена, вы должны быть уверены, что все взрослые, с которыми будет контактировать ваш ребенок, не обследованы и не больны туберкулезом.

После вакцинации, при отсутствии патологических реакции в течение часа, новорожденный может быть выписан домой под наблюдение неонатолога.

Вы должны знать, что существуют абсолютные и относительные противопоказания к вакцинации против туберкулеза.

Абсолютными противопоказаниями к иммунизации против туберкулеза являются:

— иммунодефицитные состояния (ИДС);
— генерализованная БЦЖ инфекция (лимфаденит, БЦЖ-остит), выявленные у других детей в семье;
— ВИЧ инфекция у ребенка.

Относительными противопоказаниями являются:

— недоношенность;
— масса тела при рождении менее 2500 г. (при вакцинации БЦЖ);
— менее 2300 г. (при вакцинации БЦЖ-М);
— острые инфекционные заболевания;
— злокачественные новообразования;
— ВИЧ инфекция у матери.

Дети, которые не были вакцинированы против туберкулеза, должны наблюдаться педиатром. Согласно нормативным документа, необходимо проводить пробу Манту с 2ТЕ один раз в 6 месяцев до проведения прививки против туберкулеза.

Детям, старше 2-х месяцев, перед вакцинацией БЦЖ необходима постановка реакции Манту с 2ТЕ. В случае отрицательного результата по пробе Манту с 2 ТЕ можно проводить вакцинацию против туберкулеза.

Интервал между постановкой пробы Манту с 2ТЕ и вакцинацией должен быть не менее 3-х дней и не более 2-х недель.

Эффективность вакцинации БЦЖ определяют по двум параметрам:

формирование постпрививочного рубчика (до 10мм);
положительная чувствительность к туберкулину по пробе Манту с 2ТЕ в возрасте 1 год.

Необходимо помнить, что у 10% детей от числа вакцинированных БЦЖ, при наличии сформировавшегося постпрививочного рубца, впервые положительная чувствительность к туберкулину возникает в возрасте 3-х лет.

Иммунодиагностика туберкулеза.

В Российской Федерации до настоящего времени проводится скрининг туберкулезной инфекции.

Всем детям в возрасте от 1 до 14 лет ежегодно проводятся иммунологические тесты, у подростков – возможно сочетание иммунодиагностики и рентгенологического обследования. Взрослому населению необходимо проведение флюорографического обследования один раз в два года.

Группам риска необходимо проведение рентгенологического обследования один раз в год или один раз в полгода с учетом степени риска заболеть туберкулезом.

В возрасте от 1 года до 7 лет включительно детям по-прежнему проводится постановка пробы Манту с 2 ТЕ ежегодно, если ребенок вакцинирован БЦЖ и при отсутствии противопоказаний для постановки пробы.

Необходимо знать, что проба Манту не является прививкой! Это иммунологический, а именно специфический аллергический тест, внутрикожное введение смеси антигенов, при реакции на которые может развиться кожная аллергическая реакция при наличии в организме микобактерий различного типа, в том числе и туберкулезных. До настоящего времени проба Манту рекомендована для применения ВОЗ в странах с низким и среднем уровнем жизни, так как является признанным и дешевым способом иммунодиагностики туберкулеза.

Необходимость проведения пробы Манту с 2 ТЕ в России обусловлена проведением ревакцинации против туберкулеза детям в 7 лет. Проведение ревакцинации возможно только при отрицательной пробе Манту с 2ТЕ в данном возрасте. Результаты всех остальных иммунологических тестов не учитываются.

Условно, реакция на пробу Манту с 2 ТЕ отражает развитие поствакцинальной аллергии после вакцинации БЦЖ. Поствакцинальная аллергия определяется оценкой динамики реакции Манту2ТЕ с 12 месячного возраста и до 7 лет.

К 7 годам отмечается снижение чувствительности к туберкулину, вплоть до отрицательного результата реакции на Манту 2ТЕ.

При нарастании результатов пробы более 5 мм в год или при наличии контакта с больным туберкулезом необходима постановка более информативных тестов для диагностики туберкулезной инфекции.

Необходимо помнить, что в условиях скрининга пробу Манту 2ТЕ, как и другие тесты, проводят только здоровым детям. Ели возникают сомнения в состоянии ребенка или выборе теста – обратитесь к специалисту.

Перенесенные заболевания и предшествующие прививки могут влиять на чувствительность кожи ребенка к туберкулину, в связи с этим, пробу Манту с 2 ТЕ ставят через 1 месяц после выздоровления ребенка и через 1 месяц после любой профилактической прививки.

С учетом роста сопутствующей патологии у детей может возникнуть ситуация, когда постановка пробы Манту с 2 ТЕ может быть противопоказана. В подобных ситуациях мы рекомендовали бы обратиться к специалистам (педиатру, иммунологу или фтизиатру), чтобы выбрать наиболее оптимальный иммунологический тест, который будет информативен и безопасен при его проведении для ребенка.

Новые иммунологические тесты

За последние десять лет в практической работе врачей появились три новых иммунологических теста, которые могут применяться для диагностики туберкулезной инфекции.

В Российской Федерации был разработан и внедрен новый кожный тест – Диаскинтест.

В странах Европы, Америки и Канады были внедрены тесты, которые проводятся в лабораторных условиях – IGRA- тесты (ELISPOT и QuantiferonTBGold тест).

Диаскинтест — аллерген туберкулезный рекомбинантный в стандартном разведении, не обладает сенсибилизирующим действием, нетоксичен.
Препарат Диаскинтест© или аллерген туберкулезный рекомбинантный представляет собой комплекс рекомбинантных белков, соединенных вместе (ESAT6/CFP10), который предназначен для внутрикожного введения с целью получения реакции гиперчувствительности замедленного типа.
Основными задачами, которые ставили перед собой ученые, явилась высокая диагностическая информативность нового теста, превышающая таковую у пробы Манту с 2 ТЕ; простота в использовании и доступность.
Все перечисленные задачи были выполнены, и уже первые результаты клинических исследований, проведенных в 2009 году, продемонстрировали не только высокую специфичность теста (90-100%), но и его безопасность.
Следует знать, что не стоит проводить пробу у детей с отягощенным аллергологическим анамнезом, с эндокринными нарушениями и с иммунодефицитом.

Тест с ответами по теме

1. Аллерген туберкулезный рекомбинантный рекомендуется хранить

1) при температуре от 0 до 3°С;2) при температуре от 13 до 20°С;
3) при температуре от 2 до 8°С;+

4) при температуре от 9 до 12°С.

2. В развитии туберкулезной инфекции принято выделять

1) инкубационный период;2) инфицирование МБТ;+3) продромальный период;
4) ранний период первичной туберкулезной инфекции (РППТИ) – первый год с момента инфицирования ребенка МБТ.+

3. Ведущей причиной, вызывающей гиперергическую чувствительность к туберкулину, является

1) активация туберкулезной инфекции в организме;2) заболевание туберкулезом;
3) повышение уровня специфической сенсибилизации организма вследствие суперинфекции, а также активной формы туберкулеза;+

4) фактор парааллергии.

4. Виды скрининга для выявления туберкулезной инфекции

1) выборочный;+2) диагностический;
3) массовый;+

4) провокационный.

5. Иммунодиагностика туберкулеза – это

1) переход отрицательных реакций на внутрикожное введение туберкулина в положительную реакцию, не связанную с вакцинацией против туберкулеза, или нарастание реакции на фоне поствакцинальной аллергии (ПВА) в течение года на 6 мм и более;2) совокупность диагностических тестов, позволяющих обнаружить реакцию иммунной системы на наличие микобактерий туберкулеза (Mycobacterium tuberculosis complex) (МБТ) в организме человека;+3) состояние организма с наличием клинических и рентгенологических проявлений поражения органов и систем, вызванного МБТ;

4) состояние стойкого иммунного ответа на антигены МБТ при отсутствии клинических проявлений активной формы туберкулеза. Однако присутствующие в организме МБТ способны вызвать заболевание туберкулезом.

6. Инфицирование – это

1) инфекционный процесс, при котором отсутствуют клинические проявления болезни при наличии жизнеспособных микобактерий в организме – ЛТИ;+2) переход отрицательных реакций на внутрикожное введение туберкулина в положительную реакцию, не связанную с вакцинацией против туберкулеза, или нарастание реакции на фоне поствакцинальной аллергии (ПВА) в течение года на 6 мм и более;3) состояние организма с наличием клинических и рентгенологических проявлений поражения органов и систем, вызванного МБТ;
4) формирование гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ) в ответ на введение вакцинного штамма микобактерий, проявляющейся положительной реакцией на внутрикожное введение туберкулина.

7. К задачам массовой иммунодиагностики относится

1) выявление инфицирования микобактериями туберкулеза;+2) отбор контингентов для стационарного лечения;

3) отбор лиц для вакцинации и ревакцинации;+

4) формирование групп риска по заболеванию туберкулезом.+

8. К иммунологическим тестам, основанным на высвобождении Т–лимфоцитами in vitro ИФН-ɣ относятся

1) QuantiFERON–TB Gold;+2) T-SPOT.TB;+3) проба Коха;
4) проба с аллергеном туберкулезным рекомбинантным.

9. К основным задачам индивидуальной иммунодиагностики относится

1) дифференциальная диагностика туберкулеза и других заболеваний;+2) контроль эффективности лечения больных туберкулезом;+3) определение активности туберкулезного процесса;+4) отбор лиц для вакцинации и ревакцинации.

10. К факторам риска заболевания туберкулезом относится

1) совокупность диагностических тестов, позволяющих обнаружить реакцию иммунной системы на наличие микобактерий туберкулеза (Mycobacterium tuberculosis complex) (МБТ) в организме человека;2) совокупность признаков и данных анамнеза, повышающих риск развития локального туберкулеза;+3) состояние организма с наличием клинических и рентгенологических проявлений поражения органов и систем, вызванного МБТ;
4) формирование гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ) в ответ на введение вакцинного штамма микобактерий, проявляющейся положительной реакцией на внутрикожное введение туберкулина.

11. Локальный туберкулез ‒ это

1) инфекционный процесс, при котором отсутствуют клинические проявления болезни при наличии жизнеспособных микобактерий в организме – ЛТИ;2) совокупность диагностических тестов, позволяющих обнаружить реакцию иммунной системы на наличие микобактерий туберкулеза (Mycobacterium tuberculosis complex) (МБТ) в организме человека;
3) состояние организма с наличием клинических и рентгенологических проявлений поражения органов и систем, вызванного МБТ;+

12. Массовую иммунодиагностику организует

1) противотуберкулезный диспансер;2) противотуберкулезный стационар;3) родильный дом;
4) учреждения общей лечебной сети.+

13. Место постановки пробы Манту с 2 ТЕ ППД-Л

1) верхняя треть плеча;2) верхняя треть предплечья;3) средняя треть плеча;
4) средняя треть предплечья.+

14. Место постановки пробы с аллергеном туберкулезным рекомбинантным

1) верхняя треть плеча;2) верхняя треть предплечья;3) средняя треть плеча;
4) средняя треть предплечья.+

15. Метод введения аллергена туберкулезного рекомбинантного при проведении массовой иммунодиагностики

1) внутрикожный;+2) внутримышечный;3) кожный;
4) подкожный.

16. Метод введения туберкулина при пробе Манту с 2 ТЕ ППД-Л

1) внутрикожный;+2) внутримышечный;3) кожный;
4) подкожный.

17. Определение понятия «поствакцинальная аллергия»

1) отрицательные реакции на туберкулин, связанные с вакцинацией против туберкулеза;2) положительные реакции на туберкулин, не связанные с вакцинацией против туберкулеза;
3) положительные реакции на туберкулин, связанные с вакцинацией против туберкулеза;+

4) чередование анергии и гиперергии.

18. Ответные реакции при постановке пробы Манту с 2 ТЕ ППД-Л у человека

1) местная реакция;+2) общая и очаговая реакция;3) общая реакция;
4) очаговая реакция.

19. Отрицательная реакция на пробу с аллергеном туберкулезным рекомбинантным встречается, как правило

1) у больных туберкулезом;2) у детей, имеющих поствакцинальную аллергию;+3) у лиц среднего возраста;
4) у пожилых.

20. Оценивают результаты пробы Манту с 2 ТЕ ППД-Л

1) через 12 часов после введения туберкулина;2) через 24 часа после введения туберкулина;3) через 48 часов после введения туберкулина;
4) через 72 часа после введения туберкулина.+

21. Оценивают результаты пробы с аллергеном туберкулезным рекомбинантным

1) через 12 часов после введения туберкулина;2) через 24 часа после введения туберкулина;3) через 48 часов после введения туберкулина;
4) через 72 часа после введения туберкулина.+

22. Понятие «Вираж» туберкулиновой чувствительности

1) переход отрицательных туберкулиновых реакций в положительные, не связанные с вакцинацией, или нарастание реакции на фоне поствакцинальной аллергии на 6 мм и более;+2) угасание поствакцинальной аллергии;3) формирование дополнительных элементов в папуле;
4) чередование анергии и гиперергии.

23. Понятие латентная туберкулезная инфекция включает

1) переход отрицательных туберкулиновых реакций в положительные, не связанные с вакцинацией, или нарастание реакции на фоне поствакцинальной аллергии на 6 мм и более;2) состояние организма с наличием клинических и рентгенологических проявлений специфического поражения органов и систем;3) состояние стойкого иммунного ответа на антигены микобактерий туберкулеза при наличии клинических проявлений активной формы туберкулеза;
4) состояние стойкого иммунного ответа на антигены микобактерий туберкулеза при отсутствии клинических проявлений активной формы туберкулеза.+

24. При массовой иммунодиагностике используются следующие пробы

1) кожная градуированная проба;2) проба Коха;

3) проба Манту с 2 ТЕ ППД-Л;+

4) проба с аллергеном туберкулезным рекомбинантным.+

25. При массовом обследовании на туберкулез доза туберкулина при постановке пробы Манту

1) 1 ТЕ ППД-Л;2) 10 ТЕ ППД-Л;
3) 2 ТЕ ППД-Л;+

4) 5 ТЕ ППД-Л.

26. При отказе родителей или официальных представителей от внутрикожной иммунодиагностики к рассмотрению принимаются результаты

1) QuantiFERON-TB;+2) T–SPOT–TB;+3) ИФА крови на туберкулёз;
4) ПЦР крови на ДНК МБТ.

27. Противопоказанием к проведению внутрикожных проб являются

1) аллергические заболевания;+2) карантин по детским инфекциям в детских коллективах;+3) кожные заболевания;+4) педикулез.

28. Реакция на пробу Манту с 2 ТЕ считается гиперергической у взрослых при размере папулы

1) 15 мм;2) 16 мм;3) 17 мм;
4) 21 мм.+

29. Реакция на пробу Манту с 2 ТЕ считается гиперергической у детей при размере папулы

1) 15 мм;2) 16 мм;
3) 17 мм;+

4) 21 мм.

30. Реакция на пробу Манту с 2 ТЕ считается отрицательной при размере папулы

1) 1 мм;+2) 2 мм;3) 3 мм;
4) 4 мм.

31. Реакция на пробу Манту с 2 ТЕ считается положительной при размере папулы

1) 1 мм;2) 2 мм;3) 3 мм;
4) 5 мм.+

32. Реакция на пробу Манту с 2 ТЕ считается сомнительной при размере папулы

1) 1 мм;2) 10 мм;
3) 2 мм;+

4) 5 мм.

33. Реакция на пробу с аллергеном туберкулезным рекомбинантным считается гиперергической при размере папулы

1) 10 мм;2) 13 мм;
3) 15 мм;+

4) 5 мм.

34. Реакция на пробу с аллергеном туберкулезным рекомбинантным считается отрицательной при размере папулы

1) 1 мм;+2) 2 мм;3) 3 мм;
4) 4 мм.

35. Реакция на пробу с аллергеном туберкулезным рекомбинантным считается положительной при

1) гиперемии без папулы;2) папуле любого размера;+3) размере папулы 1 мм;
4) размере папулы 4 мм.

36. Реакция на пробу с аллергеном туберкулезным рекомбинантным считается сомнительной при

1) гиперемии без папулы;+2) папуле любого размера;3) размере папулы 1 мм;
4) размере папулы 2 мм.

37. Ребенку с наличием «виража» туберкулиновой пробы необходимо провести

1) кожную градуированную пробу;2) пробу с аллергеном туберкулезным рекомбинантным;+3) ревакцинацию БЦЖ;
4) химиопрофилактику в течение 3 месяцев.

38. Регулярность постановки пробы Манту с 2ТЕ ППД-Л

1) два раза в год;2) раз в год детям с 12 месяцев;+3) раз в два года;
4) три раза в год.

39. Результат пробы Манту оценивают через 72 ч с момента ее проведения путем

1) измерения поперечного (по отношению к оси предплечья) размера гиперемии в миллиметрах прозрачной линейкой;2) измерения поперечного (по отношению к оси предплечья) размера гиперемии и инфильтрата (папулы) в миллиметрах прозрачной линейкой;+3) измерения поперечного (по отношению к оси предплечья) размера гиперемии и инфильтрата (папулы) в сантиметрах непрозрачной линейкой;
4) измерения продольного (по отношению к оси предплечья) размера гиперемии и инфильтрата (папулы) в миллиметрах прозрачной линейкой.

40. С целью выявления туберкулезной инфекции у детей от 1 года до 7 лет при массовом скрининговом обследовании используется

1) исследование мокроты на КУМ методом микроскопии;2) проба Манту с 2 ТЕ ППД-Л;+3) проба с аллергеном туберкулезным рекомбинантным;
4) флюорография легких.

41. С целью выявления туберкулезной инфекции у детей от 15 до 18 лет при массовом скрининговом обследовании используется

1) исследование мокроты на КУМ методом микроскопии;2) компьютерная томография органов грудной клетки;3) проба Манту с 2 ТЕ ППД-Л;
4) проба с аллергеном туберкулезным рекомбинантным или флюорография легких.+

42. С целью выявления туберкулезной инфекции у детей от 8 до 15 лет при массовом скрининговом обследовании используется

1) исследование мокроты методом микроскопии;2) проба Манту с 2 ТЕ ППД-Л;
3) проба с аллергеном туберкулезным рекомбинантным;+

4) флюорография легких.

43. Скрининговое обследование – это

1) совокупность диагностических тестов, позволяющих обнаружить реакцию иммунной системы на наличие микобактерий туберкулеза;2) термин обозначает комплекс безопасных исследований для больших групп населения;+3) термин обозначает комплекс не безопасных исследований для больших групп населения;
4) термин обозначает проведение обязательного диагностического минимума для больших групп населения.

44. Туберкулин – это

1) препарат, позволяющий выявить только инфицирование МБТ;2) препарат, способный вызвать специфическую аллергическую реакцию кожи у инфицированных МБТ или вакцинированных;+3) специфическая бактерия;
4) специфичный аллерген.

45. Туберкулин – это препарат, содержащий

1) живые ослабленные микобактерии человеческого и бычьего типа;2) убитые микобактерии бычьего типа;3) убитые микобактерии человеческого и бычьего типа;
4) фильтрат убитой паром 6-8 недельной культуры МБТ человеческого и бычьего типа.+

← Тест с ответами по теме «Физиотерапия хронической боли»↑ Тесты НМОТест с ответами по теме «Современные аспекты и проблемы вакцинопрофилактики. Роль медицинской сестры» →

Иммунодиагностика вироза | справочник Пестициды.ru

Первые антисыворотки к грибам были получены в 1903 году. В 1937 году делались попытки диагностировать с помощью иммунологических реакций виды грибов Рода Tilletia, паразитирующих на растениях семейства злаковых[3].

Систематическое использование иммунодиагностики приходится на 60-е годы прошлого столетия. В 1961 году результаты развития первого этапа иммунодиагностических методов были обобщены Кровэлом.

Отмечается, что в это время иммунодиагностические методы служили в основном для подтверждения таксономического статуса патогена, установленного с помощью традиционных методов фитопатологии и микробиологии.

Одновременно они позволяли выявить внутривидовые отличия фитопатогенов, установив различные серотипы у патогенов, принадлежащих к одному типу[3].

В 70–80 годах прошлого века в практику исследования фитопатогенов, в том числе вирусов, ввели метод иммуноферментного анализа, что значительно расширило возможности иммунодиагностики заболеваний растений[3].

Все методы иммунодиагностики основываются на способности антител связывать антигены. Следовательно, перед любым иммунологическим тестом стоит задача – обнаружения и (или) определения количественной характеристики взаимодействия диагностических (специфичных) антител с детектируемыми (гомологичными) антигенами[3].

Эта задача решается различными способами. Комплексы «антиген – антитело» обнаруживаются визуально, поскольку способны формировать видимые невооруженным глазом либо различимые под микроскопом преципитаты в жидкой среде или геле[3].

Антитела, участвующие во взаимодействии, могут соединяться химически с флуоресцентным красителем. Комплекс «антиген – антитело» обнаруживается под флуоресцентным микроскопом[3].

Антитела с радиоактивной меткой используют для количественного определения антигена. Антитела, маркированные коллоидным золотом, используют для иммуногистохимических исследований[3].

Наиболее распространены на практике методы:

Серологические методы иммунодиагностики вирозов – основаны на иммуногенных и антигенных свойствах фитовирусов. Они позволяют установить вид вируса, генетические взаимоотношения между вирусами, определить концентрацию и локализацию вируса в клетках и тканях растений. Методы широко применимы в медицине, ветеринарии и фитопатологии в целях диагностики вирусных, микоплазменных и бактериальных заболеваний[1].Для изучения вирусов серологический метод впервые применил М. Дворак в 1927 году. Дальнейшее развитие он получил в работах Л.С. Дунина и Н.Н. Поповой (1937), предложившими капельный метод серодиагностики[2].
Иммуноферментный анализ вироза (ИФА) или ELISA-тест (Ensyme-linked immunosorbent assay) – это высокочувствительный метод иммунодиагностики. В его основе лежит использование связанных с энзимами антител для определения специфических антигенов. Применяется для диагностики вирусов со всеми возможными формами вирионов. Широко применяется в ветеринарии, медицине, фитопатологии. Используется для выявления бактерий, грибов и вирусов во всех органах растений, в том числе в семенах и плодах[1].
Иммунофлуоресцентный анализ – люминесценция в ультрафиолетовом свете под микроскопом биологического объекта, содержащего изучаемый антиген. Изучаемый образец предварительно обрабатывается специфическими антителами, меченными флюорохромом[3].
Иммуноблоттинг (Вестерн блоттинг) – высокочувствительный способ исследования белков. Применяется для диагностики фитопатогенных микроорганизмов и вирусов по их белковым антигенам[3].
Иммунологический анализ в тканях растений – метод иммунных отпечатков (Tissue Blot Immunoassay – TBI), позволяющий с большой точностью локализовать антигены фитопатогенных организмов (главным образом вирусов) в растительных тканях[3].

Составитель: Григоровская П.И.

Страница внесена: 24.11.20 17:56

Иммунологическое обследование первичное

Это исследование включает в себя комплексную оценку субпопуляционного состава лимфоцитов, уровня циркулирующих иммунных комплексов, основных классов иммуноглобулинов и С3-, С4-компонентов комплемента периферической крови. Такой набор тестов позволяет уточнить степень поражения иммунной системы, подобрать препарат для адекватной иммунокорригирующей терапии, оценить эффективность проводимого лечения, дать прогноз течения заболевания.

* Результаты исследования выдаются с заключением врача – аллерголога-иммунолога, доктора медицинских наук.
Набор тестов:
Синонимы русские
Иммунограмма, иммунофенотипирование, клеточный иммунитет, многоцветный клеточный анализ методом проточной цитометрии.
Синонимы английские
Human Immune System, Immunophenotyping, Multicolor Flow Cytometry Cell Analysis, Human Leukocyte Differentiation Antigens.
Метод исследования
Проточная цитометрия.
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Венозную кровь.
Как подготовиться к исследованию?

Исключить из рациона алкоголь в течение 24 часов до исследования.
Не принимать пищу в течение 12 часов до исследования.
Полностью исключить прием лекарственных препаратов в течение 24 часов перед исследованием (по согласованию с врачом).
Исключить физическое и эмоциональное перенапряжение в течение 24 часов до исследования.
Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

В современном понимании иммунный статус человека – это совокупность лабораторных показателей, характеризующих количественную и функциональную активность клеток иммунной системы в данный момент времени.

Оценка иммунного статуса проводится с помощью иммунологического лабораторного обследования – иммунограммы.

Иммунограмма крови не отражает избирательно состояние патологически измененного органа или системы, но позволяет оценить иммунную систему в целом (суммарный эффект изменения активности иммунной системы в ответ на чужеродный антиген).

Определение клеточного состава (иммунофенотипирование) лимфоцитов крови – основной компонент в оценке иммунного статуса – выполняется методом проточной цитофлюориметрии.

Иммунофенотипирование – это характеристика клеток, полученная при помощи моноклональных антител или каких-либо других зондов, позволяющих судить об их типе и функциональном состоянии по наличию того или иного набора клеточных маркеров.

Иммунофенотипирование лейкоцитов заключается в обнаружении на их поверхности маркеров дифференциации, или CD-антигенов. Лейкоциты экспрессируют ряд поверхностных и цитоплазматических антигенов, уникальных для своей субпопуляции и стадии развития.

CD-антигены (англ. cluster of differentiation antigens) – это антигены на поверхности клеток, маркеры, отличающие одни типы клеток от других. Дифференциации этих антигенов изучены и стандартизованы, им присвоены определенные номера.

CD могут быть распознаны с помощью соответствующих моноклональных антител.

Используя флюоресцентно меченные моноклональные антитела, связывающиеся с определенными CD, можно с помощью метода проточной цитометрии рассчитать содержание лимфоцитов, относящихся к различным по функции или стадии развития субпопуляциям.

В основе проточной цитофлюориметрии лежит фотометрическое и флюоресцентное измерение отдельных клеток, пересекающих одна за другой вместе с потоком жидкости луч монохроматического света, обычно света лазера.

Метод позволяет не только определить количественное соотношение основных популяций лимфоцитов –

Т-лимфоциты (CD3+CD19-),
Т-хелперы/индукторы (CD3+CD4+CD45+),
Т-цитотоксические лимфоциты (Т-ЦТЛ) (CD3+CD8+CD45+),
истинные натуральные «киллеры» (NK-клетки) (CD3-CD56+CD45+),
В-лимфоциты (CD19+CD3-), –

но и оценить малые клеточные популяции, а также изучить их функциональную активность:

Т-лимфоциты, экспрессирующие маркеры NK-клеток (Т-NK-клетки) (CD3+CD56+CD45+),
NK-клетки, экспрессирующие альфа-цепь антигена CD8 (CD3-СD8+CD45+),
активированные В-лимфоциты (CD3-CD25+CD45+),
активированные Т-лимфоциты (CD3+HLA-DR+CD45+) и активированные цитотоксические лимфоциты (CD8+HLA-DR+CD45+),
В-лимфоциты и активированные NK-клетки (CD3-HLA-DR+CD45+),
активированные Т-лимфоциты, экспрессирующие альфа-цепь рецептора ИЛ-2 (CD3+CD25+CD45+),
регуляторные Т-хелперные клетки (CD4+CD25brightCD127negCD45+), выполняющие иммуносупрессорную функцию.

Такое всестороннее изучение клеточного состава лимфоцитов в совокупности с результатами других тестов, входящих в состав исследования, позволяет установить более тонкие механизмы иммунологических нарушений, уточнить степень и глубину поражения иммунной системы и подобрать препарат для последующей адекватной иммунокорректирующей терапии, оценить эффективность проводимого лечения, дать прогноз заболевания.
Когда назначается исследование?
Исследование рекомендовано для комплексного обследования пациентов, входящих в группу риска по четырем основным иммунопатологическим синдромам.
С инфекционным синдромом:

частые ОРВИ, хронические инфекции ЛОР-органов (гнойные синуситы, отиты, периодически встречающиеся лимфадениты, пневмонии с тенденцией к рецидивированию, бронхоплевропневмонии);
бактериальные инфекции кожи и подкожной клетчатки (пиодермии, фурункулез, абсцессы, флегмоны, септические гранулемы, рецидивирующий парапроктит у взрослых);
урогенитальные инфекции;
грибковые поражения кожи и слизистых оболочек, кандидоз, паразитарные инвазии;
рецидивирующий герпес различной локализации;
гастроэнтеропатия с хронической диареей неясной этиологии, дисбактериозом;
длительный субфебрилитет, лихорадка неясной этиологии;
генерализованные инфекции (сепсис, гнойные менингиты).

С аллергическим (атопическим) синдромом:

атопический дерматит;
нейродермит;
экзема с инфекционным компонентом;
тяжелая атопическая бронхиальная астма, поллиноз, хронический астматический бронхит.

С аутоиммунным синдромом:

ревматоидный артрит;
рассеянный склероз;
диффузные заболевания соединительной ткани (системная красная волчанка, склеродермия, дерматомиозит);
аутоиммунный тиреоидит;
неспецифический язвенный колит.

С иммунопролиферативным синдромом:

опухолевые процессы в иммунной системе (лимфомы, болезнь Ходжкина, острый и хронический лимфолейкоз, саркома Капоши).

Что означают результаты?
Уровень различных клеточных популяций лимфоцитов может повышаться или понижаться при различных патологических процессах в организме, таких как инфекции, аутоиммунные и онкологические заболевания, иммунодефициты, в постоперационном периоде, при трансплантации органов.
Ниже представлена таблица с клиническими ситуациями, которые могут приводить к изменениям в субпопуляционном составе лимфоцитов.

Субпопуляция лимфоцитов	Повышение показателя	Снижение показателя
T-лимфоциты (CD3+CD19-)	— Острые и хронические инфекции — Гормональный дисбаланс — Длительный прием лекарственных препаратов (особенно монотерапия) — Прием биологически активных добавок — Интенсивные занятия спортом — Беременность — T-клеточные лейкозы	— Некоторые виды инфекций — Иммунодефицитные состояния — Алкогольный цирроз печени — Карцинома печени — Аутоиммунные за-болевания — Прием иммуносупрессивных препаратов
T-хелперы (CD3+CD4+CD45+)	— Ряд аутоиммунных заболеваний — Гормональный дисбаланс — Некоторые инфекции — Отдельные T-клеточные инфекции — Отравление солями бериллия	— Иммунодефицитные состояния (основной лабораторный признак вторичного иммунодефицита) — Алкогольная болезнь печени — Аутоиммунные заболевания — Прием иммуносупрессивных препаратов или прием стероидов
T-цитотоксические лимфоциты (CD3+CD8+CD45+)	— Некоторые вирусные инфекции — Ряд T-клеточных лимфозов — Наркоз — Острая фаза аллергии — Ряд аутоиммунных патологий	— Некоторые виды аутоиммунных, аллергических заболеваний — Иммуносупрессивная терапия
Активированные T-лимфоциты (CD3+HLA-DR+CD45+)	— Инфекции — Аутоиммунная патология — Аллергия — Онкологические заболевания — Алкогольный цирроз печени — Беременность	Не имеет диагностического значения
B-лимфоциты (CD19+CD3-)	— Ряд аутоиммунных патологий — Стресс — B-клеточные лимфомы — Длительное воздействие формальдегида	Гипореактивность, перераспределение B-лимфоцитов в очаги воспаления
Натуральные «киллеры» (CD3-CD56+CD45+), (CD3-CD16+CD45+)	— Фаза восстановления после вирусных инфекций (гепатит B, C) — Ряд аутоиммунных заболеваний — Онкологические заболевания — Беременность — Алкогольный цирроз печени	— Ряд инфекций — Ряд аутоиммунных заболеваний — Курение — Иммуносупрессивная терапия и терапия стероидами
T-натуральные «киллеры», НК-Т (CD3+CD56+CD45+)	— Длительные хронические воспалительные процессы — Тяжелое течение воспалительных процессов — Длительная персистенция антигена в организме	Не имеет диагностического значения
B-1-клетки (CD19+CD5+CD27-CD45+)	— Аутоиммунная патология (системная красная волчанка, ревматоидный артрит, аутоиммунный тиреоидит, неспецифический язвенный колит, миастения) — Аутоиммунные поражения при инфекционных заболеваниях (хламидиоз, синдром Рейтера, бруцеллез) — Лимфопролиферативные процессы	Не имеет диагностического значения
T-reg. (регуляторные T-клетки (CD4+CD25brightCD127negCD45+)	— Различные новообразования — Лимфопролиферативные процессы — Инфекционные заболевания	— Аутоиммунная патология (сахарный диабет 1-го типа, рассеянный склероз, ревматоидный артрит, аутоиммунный тиреоидит, неспецифический язвенный колит, болезнь Крона, миастения) — Аллергические заболевания (бронхиальная астма, атопический дерматит, пищевая аллергия)

К каждой иммунограмме прилагается письменное заключение врача-иммунолога.

Важные замечания

Для диагностики патологий результаты этого исследования необходимо сопоставлять с клиническими данными и показателями других лабораторных анализов. Также следует отметить, что клиническую значимость исследования существенно повышает оценка иммунологического статуса пациента в динамике.

Литература

Хаитов, Р. М. Аллергология и иммунология : национальное руководство / под ред. Р. М. Хаитова, Н. И. Ильиной. – М. : ГЭОТАР-Медиа, 2009. – 656 с.
Хаитов, Р. М. Руководство по клинической иммунологии. Диагностика заболеваний иммунной системы : руководство для врачей / Р. М. Хаитов, Б. В. Пинегин, А. А. Ярилин. – М. : ГЭОТАР-Медиа, 2009. – 352 с.
Зуева Е. Е. Иммунная система, иммунограмма : рекомендации по назначению и применению в лечебно диагностическом процессе / Е. Е Зуева, Е. Б. Русанова, А. В. Куртова, А. П. Рыжак, М. В. Горчакова, О. В. Галкина – СПб. – Тверь: ООО «Издательство «Триада», 2008. – 60 с.
Кетлинский, С. А. Иммунология для врача / С. А. Кетлинский, Н. М. Калинина. СПб. : Гиппократ, 1998. – 156 с. Ярилин, А. А . Иммунология : учебник / А. А. Ярилин. – М. : ГЭОТАР-Медиа, 2010. – 752 с.
Хаитов, Р. М. Иммунология : атлас / Р. М. Хаитов, А. А. Ярилин, Б. В. Пинегин.М. : ГЭОТАР-Медиа, 2011. – 624 с.
Хаитов, Р. М. Иммунология : учебник / Р.М. Хаитов. – М. : ГЭОТАР-Медиа, 2009. – 320 с.
Хаитов, Р. М. Оценка иммунного статуса человека в норме и при патологии / Р. М. Хаитов, Б. В. Пинегин // Иммунология. – 2001. – N4. – С. 4-6.
Whiteside, T. L. Role of Human Natural Killer Cells in Health and disease / T. L. Whiteside, R. B. Herberman // Clinical and Diagnostic Laboratory Immunology. – 1994. – Vol. 1, №2. – P. 125-133.
Ginadi, L. Differential expression of T-cell antigens in normal peripheral blood lymphocytes : a quantitative analysis by flow cytometry / L. Ginadi, N. Farahat, E. Matutes [et al.] // J. Clin. Pathol. – 1996. – Vol. 49, № 1. – P. 539-544.
Merser, J.C. Natural killer T-cells : rapid responders controlling immunity and disease / J.C. Merser, M.J. Ragin, A. August // International J. Biochemistry & Cell Biology. – 2005. – № 37. – P. 1337-1343.
Никитин, В. Ю. Маркеры активации на Т-хелперах и цитотоксических лимфоцитах на различных стадиях хронического вирусного гепатита С / В. Ю. Никитин, И. А. Сухина, В. Н. Цыган [и др.] // Вестн. Рос. Воен.-мед. акад. – 2007. – Т. 17, № 1. – С. 65-71.
Boettler, T. T cells with CD4+CD25+ regulatory phenotype suppress in vitro proliferation of virus-specific CD8+ T cells during chronic hepatitis C virus infection / T. Boettler, H.C. Spangenberg, C. Neumann-Haefelin [et al.] // J. Virology. – 2005. – Vol. 79, N 12. – P. 7860-7867.
Ormandy, L.A. Increased Populations of Regulatory T Cells in Peripheral Blood of Patients with Hepatocellular Carcinoma / L.A. Ormandy, T. Hillemann, H. Wedemeyer [et al.] // J. Cancer Res. – 2005. –Vol. 65, N 6. – P. 2457-2464.
Sakaguchi, S. Naturally arising FoxP3-expressing CD4+CD25+ regulatory T cells in immunological tolerance to self- and non-self / S. Sakaguchi // Nature Immunol. – 2005. – Vol. 6, N 4. – P. 345-352.
Romagnani, S. Regulation of the T cell response / S. Romagnani // Clin. Exp. Allergy. – 2006. – Vol. 36. – P. 1357-1366.
Хайдуков С. В., Основные и малые популяции лимфоцитов периферической крови человека и их нормативные значения (метод многоцветного цитометрического анализа) / Хайдуков С. В., Зурочка А. В., Тотолян А. А., Черешнев В. А. // Мед. иммунология. – 2009. – Т. 11 (2-3). — С. 227-238.